一、冬虫夏草抗肿瘤作用的研究进展（论文文献综述）
解鸿青[1]（2021）在《蝉花活性成分抗肿瘤作用机制及以蚕蛹为替代寄主人工培育技术的研究》文中认为蝉花（Cordyceps cicadae）,又名金蝉花,是我国一种传统名贵中药材,是蝉拟青霉（Paecilomyces cicadas）感染寄生蝉科昆虫而形成的虫菌复合体。蝉花的重要生物活性物质包括核苷类成分、多糖、虫草酸、多球壳菌素等,具有抗肿瘤、免疫调节、保护神经、改善肾功能、降血糖、抗菌等广泛的药理作用。抗肿瘤功能是蝉花的重要的药理作用之一,但其相关的作用机制缺乏系统研究。同时由于天然蝉花资源渐趋枯竭,远不能满足市场日益增长的需求。基于以上问题,本论文对蝉花活性成分抗肿瘤作用及其机制,以及用家蚕蛹作为替代寄主人工培育技术进行了研究,主要研究结果如下:1、采用蒸馏水和乙醇两种常见溶剂提取蝉花有效成分,分别得到蝉花水提物（WEC）和蝉花醇提物（Ethanolic extract of Cordyceps cicadae,EEC）,再采用MTT（3-（4,5-Dimethylthiazol-2-yl）-2,5-diphenyltetrazoliumbromide,噻唑蓝）法分别检测WEC和EEC对癌细胞活力的影响,发现WEC和EEC对胃癌细胞SGC-7901的细胞活力均有明显的体外抑制作用,其中EEC的体外抑制作用更强。在对EEC敏感的肿瘤细胞株筛选中,发现EEC对SGC-7901细胞、H1299细胞、HeLa细胞、HepG2细胞和A549细胞均具有细胞毒性,其中对胃癌细胞SGC-7901的毒性最强。2、通过细胞凋亡测定、细胞周期测定、线粒体膜电位变化测定、胞内Ca2+水平测定和Western blotting等实验,发现EEC处理可引起SGC-7901细胞凋亡、S期阻滞、MMP（Mitochondrial membrane potential,线粒体膜电位）去极化和Ca2+水平过载,这些都可能是EEC抑制SGC-7901细胞生长的有效途径。此外,EEC能分别调控细胞凋亡、细胞周期以及内质网应激的相关蛋白在SGC-7901细胞中的表达水平,揭示EEC主要是通过激活caspases家族介导的细胞凋亡途径,来诱导SGC-7901细胞凋亡以及调节细胞周期、内质网应激相关调控因子表达,从而发挥其体外抗肿瘤作用。3、采用苯酚-硫酸法、BCA蛋白含量测定法、高效液相色谱法测定EEC中活性成分,发现EEC中总糖含量为211.6 μg/mg,蛋白含量为336.5 μg/mg,核苷类物质有腺嘌呤、尿苷、腺苷、N6-（2-羟乙基）-腺苷（N6-（2-Hydroxyethyl）-adenosine,HEA）,其含量分别为 1.841±0.007μg/mg、6.015±0.018 μg/mg、1.774±0.030μg/mg、5.388±0.019μg/mg。MTT法检测发现,腺嘌呤、尿苷、腺苷和HEA对SGC-7901细胞生长均有抑制作用,其中HEA的抑制作用最强。4、通过CCK-8实验、细胞凋亡测定、细胞周期测定、ROS（Reactiveoxygen species,活性氧）水平测定、MMP变化测定、Ca2+水平测定、细胞自噬水平测定和Western blotting等实验,发现HEA对胃癌细胞SGC-7901和AGS均具有体外抑制作用和促凋亡作用,HEA能诱导SGC-7901细胞的ROS产生和MMP去极化,触发caspase依赖性细胞凋亡,通过Ca2+调节诱导内质网应激,诱导细胞自噬并产生S期细胞周期阻滞。5、采用基因表达谱技术探究HEA体外抗肿瘤作用机制,发现HEA诱导SGC-7901细胞产生差异基因,这些差异基因参与细胞凋亡、细胞周期阻滞、内质网应激、细胞自噬等。GO富集分析和KEGG通路分析表明,HEA上调或下调基因主要参与癌症发生发展相关的多种信号通路。6、建立SGC-7901细胞实体瘤裸鼠模型,灌胃法给药,探究HEA的体内抗肿瘤功能,发现HEA可呈剂量依赖性地抑制模型裸鼠肿瘤大小和重量的增长,诱导肿瘤组织坏死与细胞凋亡,从而实现体内抗肿瘤作用。7、用组织分离法从天然蝉花体中分离纯化出蝉拟青霉,采用体喷法将分生孢子接种于蚕蛹体,模拟天然蝉花生长的生态环境条件,人工培育出“金蚕花”,并探明了其适宜的人工培育条件。本研究结果为扩大蝉花的药用和保健作用范围提供了理论依据,也为蝉花代用品的开发利用奠定了基础。
努尔买买提[2]（2020）在《蛹虫草的人工培育及其多糖抗肿瘤活性研究》文中提出“虫草”是广义虫草属（Cordyceps）真菌的总称。我国的虫草产业主要涉及自然资源较为匮乏的冬虫夏草（Cordyceps sinensis）、蛹虫草（C.militaris）等真菌。其中,蛹虫草的成分、药理作用与冬虫夏草相似,尤其是CMPs-4多糖,具有重要的经济价值。由于蛹虫草能够人工培育,是解决野生虫草资源严重不足的有效手段;长期以来,一直是药用真菌研究领域的热点之一。我国新疆丰富的水稻、小麦资源,为蛹虫草的人工培育提供了充足的物质条件。菌种退化是制约蛹虫草人工培育技术发展的最突出问题。本文对蛹虫草的优质高产菌种选育和培养液配方优化开展了研究,旨在为蛹虫草的规模化生产提供理论和技术指导。同时,本文还对蛹虫草多糖CMPs-4对人工食道癌细胞Eca109的增殖抑制作用、及其对Eca109细胞周期和细胞凋亡的影响等问题进行了研究与讨论,以期揭示CMPs-4的抗癌机制。本论文首先从野生蛹虫草子实体中筛选了亲本菌株,在此基础上,培育子实体;利用单孢子分离技术分离单子囊孢子,并对其交配型进行鉴定;从不同交配型单子囊孢子菌株杂交产生的子实体中分离菌种,筛选出子实体产量较高的F1代杂交菌株。其次,结合新疆地区蛹虫草人工培育实际情况,在已有研究的基础上,针对不同培养基质分别进行了处理,以分析不同培养基质处理对蛹虫草子实体长度、鲜干重、生物转化率以及产量、产值效益等方面的影响,筛选适宜本地蛹虫草人工栽培的基质。最后,运用MTT法检测了蛹虫草多糖CMPs-4对人食道癌细胞增殖抑制作用;采用流式细胞术,检测了CMPs-4多糖对Eca109细胞周期以及细胞凋亡的影响,并利用扫描电镜观察了凋亡细胞的形态;在上述研究的基础上,采用Hoechst33258染色、Annexin V-FITC/PI双染法,检测了CMPs-4多糖对Eca109细胞凋亡的影响;最后,采用Western blot方法,对Bcl-2、Bax、caspase-8和caspase-3的表达进行了检测和分析。研究结果如下:（1）从亲本子实体中共获得10个菌株。10菌株通过人工培育形成子实体后,进行单孢子分离获得60株单子囊孢子菌株,其中37株单子囊孢子菌株可以成功扩增出鉴定交配型的目的产物。根据PCR分析结果显示,22株为MAT 1-1交配型,15株为MAT 1-2交配型。37单子囊孢子菌株只能扩增MAT1-2或MAT1-1中的一个,说明MAT1-1和MAT1-2不能共存,是一个非常明显的二极异配体系。相同交配型组合培养,其原基生长发育较慢,但亲和性较高。而MAT1-2和MAT1-1不同交配型杂交组合培养,原基发育较好,但亲和比较低,上述研究结果表明,营养亲和良好的不同交配型蛹虫草菌株更容易形成子实体。（2）筛选出15个不同交配型（MAT1-1和MAT1-2单孢子菌株）组合的菌株,即A2×B4、A2×B1、A2×A9、A2×A1、A5×B1、A5×A1、B3×B8、B3×B4、B3×B1、B9×B4、B9×A9、B9×A1、B11×B8、B11×B4、B11×B1,可为后续人工栽培提供优良的菌株组合。（3）通过对培育于不同基质的蛹虫草各项指标进行方差分析发现,各组间呈显着性差异（P<0.05）,在100%大米培养基中的子实体产量更高（鲜重最高可达12.77g、干重可达2.05 g）,生物转化率达到最高（可达60.54%）,产投比最大（4.45）,产值最高（2.05元/瓶）,净利润最好（1.59元/瓶）,其子实体生物产量比原来的栽培培养基所种植的提高33.7%。（4）蛹虫草多糖CMPs-4能够抑制人食道癌Eca 109细胞的增殖,诱导人食道癌Eca109细胞凋亡,其抑瘤效果对剂量和作用时间存在显着依赖。CMPs-4显着抑制了Eca-109细胞的生长增殖,当药物浓度从100μg/m L增加至1000μg/m L时,其生长抑制率从11.70%增加到66.54%,培养24 h的IC50值为532.9μg/m L。流式细胞术检测表明,位于S期的Eca109细胞的比例逐渐从32.23%增加到49.27%（P<0.05）,即Eca109细胞在经过CMPs-4处理,被阻滞在S期,不能转化至G2/M期的细胞增多;同时,G0/G1期的细胞也无法进入到S期。受CMPs-4的抑制作用影响,Eca109的细胞凋亡率从3.12%上升到14.44%（P<0.05）,电子显微镜下也能明显观察到细胞凋亡的形态学特征。CMPs-4处理Eca109细胞后,抗凋亡蛋白Bcl-2的表达量明显下调,促凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-8表达量上调。本研究筛选了优质蛹虫草菌株和适宜新疆地区的人工栽培基质,优化了蛹虫草培养体系,为在日光温室和现代化温室条件下、充分利用新疆地区丰富的小麦和水稻资源,规模化发展蛹虫草产业提供了科学依据和技术指导。本文还对蛹虫草CMPs-4多糖的抗肿瘤机制开展了研究,为进一步深入探究蛹虫草多糖抗肿瘤作用的分子机制提供了科学参考。
周红秋[3]（2020）在《金蝉花粗多糖CP50和CP80的制备和抗肿瘤及抗肝损伤作用初步研究》文中提出药用金蝉花（Cordyceps cicadae）始记载于南北朝的《雷公炮炙论》,为麦角菌科真菌蝉草及其寄主山蝉若虫形成的干燥复合体。金蝉花含有多种活性成分,多糖是金蝉花的主要活性成分之一,具有抗肿瘤、延长寿命、调节免疫系统、抗氧化、降血脂、延缓肾衰竭等药理活性。本研究以50%和80%乙醇沉淀制备金蝉花粗多糖CP50和CP80,比较这两种粗多糖对人宫颈癌细胞Hela细胞的增殖抑制作用,筛选抗肿瘤效果较优的粗多糖,并初步研究金蝉花粗多糖抗肿瘤的机制。此外,本研究初步评估这两个粗多糖对化疗药物环磷酰胺毒性造成的肝损伤的保护作用,为金蝉花的合理开发和临床使用提供参考。实验研究的主要结果如下:1.金蝉花粗多糖CP50和CP80的制备通过单因素试验和正交试验优化Sevage法金蝉花多糖中脱蛋白的最佳条件:Sevage试剂配比三氯甲烷:正丁醇为4:1,Sevage试剂与金蝉花多糖脱蛋白体积比例为1:3,脱蛋白次数为4次,金蝉花多糖的蛋白脱除率为46.35%。按照此方法制备金蝉花粗多糖CP50和CP80得率分别为2.69%、18.79%,多糖含量为2.11%、6.23%。2.金蝉花粗多糖CP50和CP80抗肿瘤活性比较及机制初步研究以人宫颈癌细胞Hela细胞作为模型细胞,通过CCK-8法比较CP50和CP80粗多糖对Hela细胞的增殖抑制活性,二者的IC50分别为1203μg/mL和778.9μg/mL,当CP80的浓度为100、200、400、800μg/mL时对Hela细胞具有显着抑制,存活率分别为87.73%（P<0.05）、84.85%（P<0.01）、71.58%（P<0.01）和58.60%（P<0.001）;而CP50只有当浓度达到400μg/mL时,对Hela细胞的增殖抑制才具有显着性,为82.98%（P<0.05）,且随着多糖浓度的递增,细胞的增殖抑制趋势较CP80小,因此CP80的抗肿瘤活性相对优于CP50。进一步观察发现CP80对Hela细胞形态和迁移具有抑制作用;通过DCFH-DA法测定HeLa细胞内ROS活性,通过Western blot法和实时定量PCR法测定Bax、Bcl-2和p53的蛋白和基因表达水平,结果表明CP80各浓度给药组在Hela细胞内的ROS活性比空白组显着提高（P<0.05）,Bax、p53的蛋白和基因的表达水平显着提高（P<0.05）,Bcl-2的蛋白和基因表达水平显着下降（P<0.05）。因此,推断金蝉花粗多糖CP80是通过提高Hela细胞中ROS的活性及介导p53信号通路致使细胞凋亡。3.金蝉花粗多糖CP50和CP80抗环磷酰胺致肝损伤的活性研究以C57BL/6小鼠,通过给予140 mg/mL环磷酰胺构建肝损伤模型。除了金蝉花CP50低剂量组（50 mg/mL）外,其余各给药组的肝脏指数均比模型组有降低,而脾脏指数有所上升,CP80高剂量组（200 mg/kg）比低剂量组（50 mg/mL）的效果比较明显;ALT、AST的活力值和MDA的含量较模型组有不同程度的下降,且CP80在高剂量（200 mg/kg）时显着降低CPA致小鼠肝损伤中MDA的活性（P<0.05）。结果表明,金蝉花粗多糖对肿瘤化疗药CPA诱导的C57BL/6小鼠药物性肝损伤具有一定的保护作用,CP80的效果稍好于CP50。
王跃凤[4]（2020）在《猫棒束孢菌丝粉免疫活性及其化学成分研究》文中研究说明冬虫夏草（Cordyceps Sinensis）是冬虫夏草菌和蝙蝠蛾科幼虫的复合体,为传统三大名贵补益药材之一。冬虫夏草具有增强免疫力、抗肿瘤、抗疲劳等多种功效。但因药源紧缺昂贵,人们对冬虫夏草中分离的菌种经发酵得到的菌丝体开展了大量的研究。猫棒束孢（Isaria felina,IF）作为从天然冬虫夏草虫草体中分离得到的一株新的真菌,具有较好的药用前景。为此,本工作对猫棒束孢菌丝粉及其分离所得多糖进行了免疫调节功能的研究;并利用高效液相色谱-四级杆串联飞行时间质谱（high performance liquid chromatography coupled with quadrupole time-of-flight mass spectrometry,HPLC-Q-TOF-MS）对猫棒束孢菌丝粉的醇溶性主要化学成分进行了结构鉴定。具体研究内容及结果如下:（1）猫棒束孢菌丝粉的免疫活性研究探讨猫棒束孢菌丝粉（Isaria felina mycelium powder,IFMP）对环磷酰胺所致免疫低下小鼠免疫功能的影响。将昆明小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组(香菇多糖,200 mg·kg-1)、IFMP低、中、高剂量组(100、200、400 mg·kg-1),除空白对照组外,其余5组通过腹腔注射环磷酰胺建立免疫低下小鼠模型,每日灌胃给药一次,共给药10d,给药结束后,检测小鼠体质量增长值、肝脏指数、脾脏指数、胸腺指数、血常规指标;碳廓清法和迟发型变态反应（Delayed type hypersensitivity,DTH）测定小鼠非特异性免疫功能和细胞免疫功能;双抗体夹心ELISA法测定小鼠血清中TNF-α水平。结果表明:与空白对照组比较,模型对照组小鼠各检测指标均显着降低（P<0.05）。与模型对照组比较,IFMP各剂量组小鼠的脾脏指数,白细胞、红细胞、血小板等血常规指标,吞噬指数α,足跖厚度差,TNF-α水平均显着升高（P<0.05）。综上,IFMP对环磷酰胺所致免疫低下模型小鼠具有免疫保护作用。（2）猫棒束孢菌丝粉多糖的提取及其免疫活性研究采用水提醇沉法提取猫棒束孢菌丝粉多糖（Isaria felina mycelium powder polysaccharide,IFMPP）,通过检测小鼠体质量增长值、脏器指数、血常规指标、血清中溶菌酶、IL-2、TNF-α、IgG的含量,从而观察IFMPP的免疫调节作用,并将IFMPP与IFMP二者的中剂量组效果进行比较。结果表明:IFMPP可使免疫抑制小鼠脾脏指数、胸腺指数、血常规指标及溶菌酶、IL-2、TNF-α、IgG含量均不同程度显着升高（P<0.05）,且IFMPP中剂量组与IFMP中剂量组相比,IFMPP中剂量组效果较好。总之,IFMPP对环磷酰胺所致免疫低下模型小鼠的免疫功能有促进作用。（3）猫棒束孢菌丝粉主要化学成分的结构鉴定本工作在优化高效液相色谱分离猫棒束孢菌丝粉醇提物条件的基础上,采用HPLC-Q-TOF-MS联用法对猫棒束孢菌丝粉醇提物进行了测定,并通过正、负离子扫描模式进行数据采集,利用质谱工作站中查找、识别化合物等功能,结合数据库以及文献资料中二级碎片裂解规律提供的化合物信息,共鉴定出36种化合物,其中:核苷类（18种）、氨基酸类（15种）、甾醇类（1种）和糖苷类（2种）。其结果为猫棒束孢菌丝粉的基础研究、质量评价、活性成分筛选提供了科学依据,并为其开发利用奠定了基础。
杨建鑫[5]（2020）在《虫草多糖对X射线辐射损伤小鼠的保护作用研究》文中研究说明目的:探讨虫草多糖（CSP）对X射线辐射损伤小鼠的保护作用及相关机理,为虫草多糖作为有效的辐射保护剂或减少辐射损伤的替代策略提供理论依据。方法:本研究采用热水浸提法提取发酵冬虫夏草菌粉中的多糖,利用改良的苯酚硫酸法测定多糖的含量。测定实验小鼠30 d的存活率,检测实验小鼠外周血象、脏器指数、骨髓DNA含量、肝脏组织中抗氧化酶活力及脂质过氧化物含量和组织病理形态学等相关指标以及MAPK家族中相关酶的表达。存活率实验中SPF级雄性昆明小鼠随机分为6组:正常对照组、辐射模型组、阳性对照组（氨磷汀,150 mg/kg）、CSP低剂量组（100mg/kg）、CSP中剂量组（200 mg/kg）、CSP高剂量组（400 mg/kg）。CSP低、中、高剂量组于每日灌胃（20 ml/kg）给予相应剂量药物,正常对照组和辐射模型组小鼠灌胃给予等体积生理盐水,连续给药14 d后进行辐照,阳性对照组小鼠于辐照前30 min腹腔注射氨磷汀溶液。除正常对照组外其余各组小鼠采用医用电子直线加速器进行全身一次性X射线辐照,辐照剂量为8 Gy,辐照后连续观察30 d小鼠的生存状态及死亡情况。指标及相关机理测定实验中动物分组及给药同存活率实验,除正常对照组外其余各组小鼠进行全身一次性X射线辐照,辐照剂量为5 Gy,观察辐照前后小鼠的体重变化及辐照后第1、3、5 d外周血象的变化,辐照后第5 d测定小鼠胸腺及脾脏指数、骨髓DNA含量、肝脏组织超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、过氧化氢酶（CAT）的活力和丙二醛（MDA）的含量并观察胸腺、脾脏病理形态学的变化情况。分别采用ELISA和q PCR方法测定辐照后第5 d小鼠肝脏组织中细胞外信号调节激酶1（ERK1）、c-Jun氨基末端激酶1（JNK1）和p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）的蛋白及m RNA表达。结果:发酵冬虫夏草菌粉中多糖的平均含量为1.35%,改良后的苯酚硫酸法测得吸光度稳定、精密度和重复性良好,测定结果准确可靠。存活率实验结果表明,CSP能够改善辐射损伤小鼠体征并显着提高小鼠存活率。经8 Gy X射线辐照后,辐射模型组小鼠饮食饮水减少、皮毛光泽减退、行动迟缓且精神萎靡,部分小鼠眼睛出现出血肿胀现象,较正常对照组30 d内存活率显着下降50%;CSP低、中、高剂量组小鼠体征有所改善,30 d内存活率和存活时间显着提高,其中CSP中剂量组小鼠较辐射模型组存活率显着升高80%。指标测定实验结果显示,CSP能够显着改善辐射损伤小鼠的外周血象。经5 Gy X射线辐照后,与辐射模型组相比,CSP中剂量组小鼠辐照后第3d WBC和LYM数目分别显着升高59.65%和70.00%,CSP低剂量和中剂量组小鼠GRA数目在辐照后第5 d分别升高100.00%和71.43%,CSP低剂量组小鼠在辐照后第3 d和第5 d PLT数目显着降低22.84%和24.43%。同时,CSP能够显着提高辐射损伤小鼠胸腺和脾脏指数,其中以CSP中剂量组最为明显,与辐射模型组相比,小鼠胸腺和脾脏指数分别升高69.62%和30.00%。但CSP对辐射损伤小鼠骨髓DNA的含量无显着影响,与辐射模型组相比,CSP各组骨髓DNA含量均有上升趋势,但无统计学意义。另外,CSP能显着改变辐射损伤小鼠肝脏组织中抗氧化酶的活力和脂质过氧化物的含量。与辐射模型组相比,CSP低、中、高剂量组肝脏组织中SOD活力分别显着升高64.71%、52.36%和44.07%,GSH-Px活力分别显着降低11.29%、18.16%和22.37%,CAT活力分别降低6.24%、10.88%和17.95%,CSP低剂量组MDA含量显着减少32.22%,中、高剂量组无显着性变化。病理学结果表明CSP能明显改善辐射造成的胸腺及脾脏损伤,与辐射模型组相比,CSP各组中胸腺及脾脏淋巴细胞数量增多,病理变化均有改善。相关机理研究结果表明,CSP能使辐射损伤小鼠肝脏组织中ERK1、JNK1和p38 MAPK的蛋白和m RNA表达发生显着变化。与辐射模型组相比,CSP中、高剂量组ERK1蛋白表达分别降低16.42%和32.70%,CSP低剂量组ERK1蛋白表达降低9.95%,但差异无统计学意义;CSP高剂量组JNK1的蛋白表达下降了47.98%,CSP低、中剂量组JNK1蛋白表达分别下降了17.25%和14.47%,但差异无统计学意义;CSP低、中、高剂量组p38 MAPK的蛋白表达分别显着降低了18.95%、24.10%和34.73%。与辐射模型组相比,CSP低、中、高剂量组ERK1的m RNA表达分别降低了60.92%、52.87%和63.22%;CSP低、中、高剂量组JNK1的m RNA表达分别下降66.77%、53.23%和57.54%;CSP低、中、高剂量组p38 MAPK的m RNA表达分别显着下降71.06%、61.89%和55.30%。结论:虫草多糖对X射线辐射损伤小鼠具有一定保护作用,推测该作用与提高机体免疫、清除体内自由基有关,其作用机制可能是通过调节MAPK信号传导途径减轻辐射诱导的机体损伤。
江志彬,苏思韵,李斌,钟先锋[6]（2019）在《北冬虫夏草多糖抗肿瘤活性研究进展》文中研究说明北冬虫夏草多糖具有抗肿瘤、降血糖、抗氧化、抗炎和免疫调节等药理活性,具有良好的应用价值和开发前景。通过查阅、归纳和总结国内外关于北冬虫夏草多糖抗肿瘤作用的相关文献资料,对其抗肿瘤作用及其机制进行了综述,以期为北冬虫夏草多糖在抗肿瘤方面的进一步研究和推广应用提供参考依据。
韩日畴,吴华,陶海平,丘雪红,刘桂清,饶中臣,曹莉[7]（2019）在《中国冬虫夏草研发70年》文中研究指明冬虫夏草是具有食药用价值的传统名贵生物资源,其研发历史贯穿从实验室到产业的全过程。低海拔人工培植成功开创了传统资源现代化的壮举,对科学和产业都具有里程碑式的意义。本文从冬虫夏草菌、蝙蝠蛾寄主昆虫、冬虫夏草活性成分和药理药效作用、安全性等方面综述我国冬虫夏草70年研发进展、现存问题和未来展望。
陈天丽[8]（2019）在《复方参草菌质颗粒制备工艺及其抗肿瘤活性研究》文中指出目的:优化人参-冬虫夏草发酵菌质（参草菌质）的发酵工艺和质量标准,建立复方参草菌质颗粒的制备工艺,揭示复方参草菌质颗粒抗肿瘤活性及其作用机理,以期为复方参草菌质颗粒后续的研究和开发奠定基础,为中药复方抗肿瘤提供新的理论依据。方法:1.采用单因素实验和响应曲面等统计学方法对用冬虫夏草菌发酵人参药材的工艺进行系统优化;采用HPLC-Q-TOF-MS技术对参草菌质中主要皂苷类成分进行辅助定性分析;引入HPLC-QQQ-MS技术中的MRM模式,同时对参草菌质中11个皂苷类成分进行了定量分析;按优选工艺制备10批参草菌质,以确定相应含量测定范围。2.MTT法检测含人参复方与含参草菌质复方对非小细胞肺癌A549细胞增殖的影响,通过检测细胞存活率,对比两个复方的抗肿瘤活性。3.采用正交试验等方法对复方参草菌质颗粒的提取及分离工艺、浓缩干燥工艺、制剂成型工艺等进行研究,制备中试样品,并对不同批次的样品进行质量检查。4.药效学研究方面,首先采用MTT法检测不同浓度的复方参草菌质颗粒对A549细胞增殖的抑制作用;通过划痕实验和Transwell实验检测复方参草菌质颗粒对A549细胞迁移和侵袭的调控作用;利用流式细胞仪检测了药物处理后A549细胞周期和细胞凋亡情况;并通过Western Blot实验检测肿瘤组织中凋亡相关蛋白Caspase3、Bax、Bcl-2的表达及相关通路蛋白TGF-B、smad2、p-smad2、smad3、p-smad3、E-cadherin的表达。进而以接种肺癌细胞的裸鼠为体内模型,检测给药后裸鼠体重和肿瘤体积变化;流式细胞仪检测血液及脾脏细胞中相关表面蛋白CD4、CD8a、CD11b、Ly-6G/Ly-6c的表达。5.采用TMT标记、高效液相色谱分级技术以及基于质谱的定量蛋白质组学技术,对使用复方参草菌质颗粒水溶液处理A549细胞前后的样本进行定量蛋白组的研究。结果:1.建立了稳定的参草菌质制备工艺,参草菌质的平均得率约为69.8%;通过对参草菌质的主要皂苷类成分进行定性和定量分析,发现其中所含11种皂苷Rg1、Re、Rb1、Rh1、Ro、Rd、Rf、Rb2、Rg3、F2和Rg2的平均含量可以分别达到:1.50mg/g、1.32mg/g、0.64mg/g、1.12mg/g、1.79mg/g、3.56mg/g、0.37mg/g、0.48mg/g、0.33mg/g、0.51mg/g和0.70mg/g;确定了相应成分的含量测定范围,规定参草菌质中人参皂苷Rd不得少于0.3%,人参皂苷Rh1不得少于0.1%,人参皂苷Rb1、Re、Rg1总量不低于0.3%,并最终制定了参草菌质的质量标准。2.对比含参草菌质复方和含人参复方处理A549细胞后细胞的存活率,发现含有参草菌质的复方抗肿瘤效果明显优于含有人参的复方;遵循传统中药制剂的制备特点,采用水煎煮法提取,以代表整体效果的总黄酮提取量为考察指标,确定了复方参草菌质颗粒的最佳提取条件和制剂成型工艺,制备的三批中试样品质量符合《中国药典》2015年版四部附录0104颗粒剂项下的有关规定。3.复方参草菌质颗粒能够显着抑制A549肺癌细胞的增殖,当浓度达到100μg/m L时,其作用最为显着（P<0.05）;流式细胞仪检测结果表明复方参草菌质颗粒能抑制细胞进入G1期,同时降低G1/S期,延长G2期,阻止细胞增殖,诱导A549细胞凋亡;肿瘤相关蛋白检测表明复方参草菌质颗粒能有效调节凋亡相关蛋白的表达;提高Caspase3、Bcl-2和E-cadherin的表达,同时降低TGF-β1、Bax的表达。4.复方参草菌质颗粒对A549细胞的迁移和侵袭具有显着的抑制作用（P<0.01）;对A549肺癌皮下移植肿瘤有一定的治疗效果,能有效改变小鼠血液及脾脏细胞中的免疫蛋白细胞CD4和CD8、细胞Ly-6G/Ly-6C和CD11b的变化,且对免疫蛋白和免疫细胞的刺激作用呈剂量依赖性。5.对复方参草菌质颗粒处理前后的A549细胞进行了定量蛋白质组学检测。一共鉴定了5641个蛋白质,其中4569个蛋白质包含定量信息。以1.2倍为差异表达变化阈值,以统计学检验t-test p-value<0.05为显着性阈值,与对照组相比192个蛋白表达发生上调,272个蛋白表达发生下调。对所有鉴定到的蛋白质进行了系统的生物信息学分析（蛋白功能注释）,并且对所有差异表达蛋白进行了功能分类、功能富集及基于功能富集的聚类分析,进而通过免疫组化、反转录PCR的方法验证了复方参草菌质颗粒靶蛋白HDAC3的表达水平。结论:本研究优化了参草菌质的发酵工艺,制定了参草菌质的质量标准,为制剂开发过程中原料的质量控制提供了理论依据;建立了复方参草菌质颗粒的制备工艺,为后续研究和扩大生产奠定了基础;通过细胞水平证实了复方参草菌质颗粒具有抗肿瘤活性,说明了复方参草菌质颗粒在抑制非小细胞肺癌方面作用显着,并通过蛋白质组学进一步阐释了其作用机理,筛选出潜在作用靶点HDAC3,为肺癌的临床治疗提供了新方向。
刘建兵[9]（2018）在《一株抑制HepG2细胞活性优质蛹虫草菌株MF27的筛选》文中进行了进一步梳理本研究旨在筛选出一株具有抗肝癌活性的优质蛹虫草菌株。首先从不同渠道收集到22株供试菌株,通过ITS序列和拮抗实验对供试菌株进行菌种区别性鉴定;接着,比较供试菌株的菌种性能、虫草素含量,再以肝癌HepG2细胞为模型,MTT法检测供试菌株菌丝乙醇提取物的抗肝癌活性,筛选出一株优质蛹虫草菌株;最后,进一步与几种常见虫草属真菌做抗HepG2活性比较,为优质菌株的推广应用提供理论依据。主要研究内容与结果如下:（1）根据ITS序列同源性比对及构建的系统发育树,确证收集到的22株菌株均为蛹虫草,但供试菌株在系统发育树上几乎无差别的处于同一发育地位,显示亲缘关系很近,无法区别“同种异名、异种同名”现象;（2）进一步通过ITS序列拆分网络图和拮抗试验,对供试菌株进行区别性鉴定,结果显示22株蛹虫草在ITS序列上存在一定差异,并且菌株之间均有拮抗反应,表明22株蛹虫草之间均存在遗传差异,不存在“同种异名、异种同名”现象;（3）通过比较供试菌株的转色能力、菌丝生长速度、生物量及子实体产量等菌种性能,发现MF27的菌种性能表现均较好,生物量和子实体产量高于其它菌株,平均生物量1.273±0.185g/100mL发酵液,平均子实体产量45.638±11.354 g/盒,生物学效率高达97.1%;（4）再比较供试菌株的发酵菌丝体虫草素含量及乙醇提取物抗HepG2细胞活性,发现MF27不仅菌丝体虫草素含量（1.53±0.47mg/g）比其它菌株高,而且抗HepG2细胞活性也很强,IC50为48.06 μg/mL;（5）综上表明MF27是一株高抗肝癌活性的优质蛹虫草菌株。本文进一步比较MF27与其它虫草菌的抗HepG2细胞活性,实验结果显示蛹虫草MF27的菌丝体乙醇提取物对HepG2细胞的IC50值比蝉棒束孢（MF11、MF12、MF13）、细脚棒束孢（MF7、MF9、MF14）、球孢白僵菌（MF10）、蝙蝠蛾拟青霉（金水宝胶囊）和中华被毛孢（百令胶囊）更低,抗HepG2细胞活性更强。本研究筛选得到抗肝癌活性的优质蛹虫草菌株MF27,MF27不仅比其他供试蛹虫草菌株具有更高的子实体产量、虫草素含量和抗HepG2细胞活性,而且在抗HepG2细胞活性上比中华被毛孢（百令胶囊）和其它一些虫草真菌更好,或可作为冬虫夏草潜在的替代品,有良好的开发应用价值。
白雪莲[10]（2018）在《冬虫夏草水提液对顺铂增效减毒及体外对A375细胞作用研究》文中进行了进一步梳理冬虫夏草是是一种极其名贵的药用真菌。由于其自身特性和特殊的生长环境,导致自然资源十分稀少,乱采滥挖的现象更加剧了资源匮乏,而市场需求却不断增加,因此寻找合适的替代品成为研究的重点。广东东阳光有限公司经过10年的研发实现了冬虫夏草的产业化繁育技术。该技术所培育的冬虫夏草水提液经过鉴定有着不低于野生冬虫夏草的理化特性,说明冬虫夏草水提液有成为野生冬虫夏草替代品的可能。首先,本课题组对冬虫夏草水提液体外抗肿瘤作用和体内联合顺铂（DDP）用药对Lewis移植小鼠模型增效减毒的作用进行研究。其次,本课题组对AECS和DDP联合用药增效减毒作用机制进行研究。最后,在斑马鱼模型中进一步探究联合用药的增效减毒性作用。结果发现,冬虫夏草水提液在体外对多种肿瘤细胞具有显着的抗肿瘤作用。AECS通过抑制肿瘤生长从而提高DDP抗肿瘤活性,延长了小鼠生存时间,并减轻由于DDP引起Lewis移植瘤模型肝肾毒性作用,同时在Lewis移植瘤模型中发现伴随着NFκB和AKT/MMP2/MMP9通路的减弱。此外,在A549移植瘤斑马鱼模型中,与DDP组比较,联合治疗组也减轻了由于化疗药物引起的斑马鱼毒性。这些结果表明,AECS与DDP联合用药是一种可以提高以DDP为基础的化疗疗效并且能够减少由于DDP治疗引起肝肾毒性的新型治疗方式,可能与抑制NF-κB/IκBα和AKT/MMP2/MMP9通路有关。为了研究冬虫夏草水提液体外抗肿瘤作用机制。首先对肿瘤细胞增殖的影响进行研究,通过MTT法检测冬虫夏草水提液对人恶性黑色素瘤A375细胞增殖能力的影响;克隆形成实验检测其对A375细胞克隆形成能力的影响;流式细胞仪检测冬虫夏草水提液对人恶性黑色素瘤A375细胞周期分布的影响。然后对恶性黑色素瘤细胞的侵袭迁移能力的影响进行探究。通过划痕实验检测冬虫夏草水提液对A375细胞迁移能力的影响;通过黏附实验检测对A375细胞黏附能力的影响;transwell小室实验检测对A375细胞迁移和侵袭能力的影响;采用western blot法检测对A375细胞中MMP-2、p-AKT、MMP-9、Bcl-2、Bax、CyclinE、CDK2及CDK4蛋白表达的影响。结果发现冬虫夏草水提液能够显着抑制A375细胞的增殖和克隆形成的能力,并且可以将A375细胞阻滞在S期。而划痕实验和transwell实验结果则说明冬虫夏草水提液对A375细胞的迁移和侵袭能力有抑制作用,黏附实验结果说明A375细胞黏附能力受冬虫夏草水提液影响。Western blot 结果显示 MMP-9、p-AKT、MMP-2、Bcl-2、CyclinE、CDK2、CDK4蛋白表达减少;Bax、P21蛋白表达增加。以上结果说明冬虫夏草水提液能显着抑制恶性黑色素瘤A375细胞的增殖及侵袭迁移能力,其作用机制可能与阻滞细胞周期调控周期相关蛋白、激活AKT/MMP-2/MMP-9通路及调控MMPs家族蛋白及p-AKT蛋白的表达有关。
二、冬虫夏草抗肿瘤作用的研究进展（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、冬虫夏草抗肿瘤作用的研究进展（论文提纲范文）
（1）蝉花活性成分抗肿瘤作用机制及以蚕蛹为替代寄主人工培育技术的研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 缩略语对照表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 文献综述 |
| 1.1 蝉花的概述 |
| 1.1.1 蝉花的形成 |
| 1.1.2 蝉花的生态分布 |
| 1.2 蝉花的化学成分 |
| 1.2.1 核苷类物质 |
| 1.2.2 麦角甾醇及其过氧化物 |
| 1.2.3 多糖 |
| 1.2.4 多球壳菌素 |
| 1.2.5 虫草酸 |
| 1.3 蝉花的药理作用与保健功能 |
| 1.3.1 蝉花的实用方法 |
| 1.3.2 蝉花的安全性 |
| 1.3.3 蝉花的抗肿瘤活性 |
| 1.3.4 蝉花的免疫调节活性 |
| 1.3.5 蝉花的神经保护功能 |
| 1.3.6 蝉花的肾脏保护功能 |
| 1.3.7 蝉花的降血糖能力 |
| 1.3.8 蝉花的抗菌功能 |
| 1.4 虫草的人工培育 |
| 1.4.1 虫草菌的液体发酵 |
| 1.4.2 虫草菌的固体发酵 |
| 1.4.3 用替代寄主昆虫人工培育虫草 |
| 1.5 本研究的目的意义、研究内容和技术路线 |
| 1.5.1 研究的目的和意义 |
| 1.5.2 研究内容 |
| 1.5.3 技术路线 |
| 第2章 蝉花不同溶剂提取物对体外肿瘤细胞活力的影响 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料和仪器 |
| 2.2.1 实验材料和试剂 |
| 2.2.2 主要仪器与设备 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 蝉花粉的制备 |
| 2.3.2 蝉花水提物的制备 |
| 2.3.3 蝉花醇提物的制备 |
| 2.3.4 细胞培养 |
| 2.3.5 MTT实验 |
| 2.3.6 细胞形态学观察 |
| 2.3.7 数据处理和分析 |
| 2.4 结果与分析 |
| 2.4.1 蝉花水提物和醇提物的抗肿瘤活性比较 |
| 2.4.2 蝉花醇提物体外对多种肿瘤细胞活力的影响 |
| 2.4.3 蝉花醇提物不同作用时间对SGC-7901细胞活力的影响 |
| 2.4.4 蝉花醇提物对SGC-7901细胞形态的影响 |
| 2.5 讨论 |
| 2.6 小结 |
| 第3章 蝉花醇提物的体外抗肿瘤作用机理研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料和仪器 |
| 3.2.1 实验材料和试剂 |
| 3.2.2 主要仪器与设备 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 蝉花醇提物的制备 |
| 3.3.2 细胞凋亡实验 |
| 3.3.3 细胞周期实验 |
| 3.3.4 线粒体膜电位变化测定 |
| 3.3.5 细胞内Ca~(2+)浓度测定 |
| 3.3.6 蛋白表达量检测 |
| 3.3.7 统计分析 |
| 3.4 结果与分析 |
| 3.4.1 蝉花醇提物EEC对SGC-7901细胞凋亡的影响 |
| 3.4.2 蝉花醇提物EEC对SGC-7901细胞周期的影响 |
| 3.4.3 蝉花醇提物EEC对SGC-7901细胞线粒体膜电位的影响 |
| 3.4.4 蝉花醇提物EEC对SGC-7901细胞Ca~(2+)浓度的影响 |
| 3.4.5 蝉花醇提物EEC对SGC-7901细胞凋亡、细胞周期和内质网应激相关蛋白表达的影响 |
| 3.5 讨论 |
| 3.6 小结 |
| 第4章 蝉花醇提物的化学成分分析 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料和仪器 |
| 4.2.1 实验材料和试剂 |
| 4.2.2 主要仪器与设备 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 多糖含量测定 |
| 4.3.2 蛋白质含量测定 |
| 4.3.3 核苷类物质鉴定及其含量测定 |
| 4.3.4 EEC中几种核苷类物质的抗肿瘤活性 |
| 4.3.5 统计分析 |
| 4.4 结果与分析 |
| 4.4.1 蝉花醇提物中的多糖含量 |
| 4.4.2 蝉花醇提物中的蛋白质含量 |
| 4.4.3 蝉花醇提物中的核苷类物质鉴定及其含量分析 |
| 4.4.4 蝉花醇提物中核苷类物质抗肿瘤效果的比较 |
| 4.5 讨论 |
| 4.6 小结 |
| 第5章 N6-(2-羟乙基)-腺苷的体外抗肿瘤作用及其机理研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验材料和仪器 |
| 5.2.1 实验材料和试剂 |
| 5.2.2 主要仪器与设备 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 CCK-8实验 |
| 5.3.2 相差显微镜观察细胞形态 |
| 5.3.3 细胞凋亡实验 |
| 5.3.4 激光共聚焦观察细胞凋亡 |
| 5.3.5 细胞周期实验 |
| 5.3.6 细胞活性氧水平检测 |
| 5.3.7 线粒体膜电位变化测定 |
| 5.3.8 细胞内Ca~(2+)浓度测定 |
| 5.3.9 透射电镜(Transmission electron microscopy, TEM)观察细胞自噬 |
| 5.3.10 蛋白表达水平的检测 |
| 5.3.11 统计分析 |
| 5.4 结果与分析 |
| 5.4.1 N6-(2-羟乙基)-腺苷对人胃癌细胞SGC-7901和AGS以及人正常细胞HEK293活力的影响 |
| 5.4.2 N6-(2-羟乙基)-腺苷处理时间对人胃癌细胞SGC-7901活力的影响 |
| 5.4.3 N6-(2-羟乙基)-腺苷处理时间对人胃癌细胞AGS活力的影响 |
| 5.4.4 N6-(2-羟乙基)-腺苷对SGC-7901细胞形态的影响 |
| 5.4.5 N6-(2-羟乙基)-腺苷对人胃癌细胞凋亡的影响 |
| 5.4.6 N6-(2-羟乙基)-腺苷诱导SGC-7901细胞凋亡的共聚焦显微镜观察 |
| 5.4.7 Caspase抑制剂与N6-(2-羟乙基)-腺苷联合给药对SGC-7901细胞凋亡的影响 |
| 5.4.8 N6-(2-羟乙基)-腺苷对SGC-7901细胞活性氧(ROS)水平的影响 |
| 5.4.9 N6-(2-羟乙基)-腺苷对SGC-7901细胞线粒体膜电位的影响 |
| 5.4.10 N6-(2-羟乙基)-腺苷对SGC-7901细胞周期分布的影响 |
| 5.4.11 N6-(2-羟乙基)-腺苷对SGC-7901细胞Ca~(2+)浓度的影响 |
| 5.4.12 内质网应激抑制剂4-PBA对N6-(2-羟乙基)-腺苷诱导细胞凋亡的影响 |
| 5.4.13 N6-(2-羟乙基)-腺苷对SGC-7901细胞自噬的影响 |
| 5.4.14 自噬抑制剂3-MA对N6-(2-羟乙基)-腺苷诱导细胞凋亡的影响 |
| 5.4.15 N6-(2-羟乙基)-腺苷对SGC-7901细胞凋亡、细胞周期、内质网应激以及自噬相关蛋白表达的影响 |
| 5.5 讨论 |
| 5.6 小结 |
| 第6章 基于基因表达谱的N6-(2-羟乙基)-腺苷体外抗肿瘤机制研究 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 实验材料和仪器 |
| 6.2.1 实验仪器 |
| 6.2.2 实验材料和试剂 |
| 6.3 实验方法 |
| 6.3.1 细胞培养 |
| 6.3.2 表达谱样品RNA提取 |
| 6.3.3 样品文库构建及测序 |
| 6.3.4 测序数据分析 |
| 6.3.5 差异基因正确性验证 |
| 6.4 结果与分析 |
| 6.4.1 基因测序数据过滤 |
| 6.4.2 差异基因检测 |
| 6.4.3 差异基因GO功能分析 |
| 6.4.4 差异基因Pathway功能分析 |
| 6.4.5 差异表达基因的qRT-PCR验证 |
| 6.5 讨论 |
| 6.6 小结 |
| 第7章 N6-(2-羟乙基)-腺苷的体内抗肿瘤作用及其机理研究 |
| 7.1 引言 |
| 7.2 实验材料和仪器 |
| 7.2.1 实验动物 |
| 7.2.2 实验材料和仪器 |
| 7.3 实验方法 |
| 7.3.1 裸鼠移植瘤模型的建立 |
| 7.3.2 试验分区与处理 |
| 7.3.3 一般情况观察 |
| 7.3.4 肿瘤重量测定以及抑瘤率计算 |
| 7.3.5 肿瘤组织标本制备 |
| 7.3.6 苏木精伊红(Hematoxylin-eosin,H&E)染色 |
| 7.3.7 TUNEL染色 |
| 7.3.8 统计分析 |
| 7.4 结果与分析 |
| 7.4.1 N6-(2-羟乙基)-腺苷对SGC-7901细胞移植瘤模型裸鼠肿瘤体积的影响 |
| 7.4.2 N6-(2-羟乙基)-腺苷对SGC-7901细胞移植瘤模型裸鼠肿瘤重量的影响 |
| 7.4.3 N6-(2-羟乙基)-腺苷对SGC-7901细胞移植瘤模型裸鼠肿瘤抑制率的影响 |
| 7.4.4 N6-(2-羟乙基)-腺苷对SGC-7901细胞移植瘤模型裸鼠体重的影响 |
| 7.4.5 N6-(2-羟乙基)-腺苷灌胃SGC-7901细胞移植瘤模型裸鼠肿瘤组织的H&E染色情况 |
| 7.4.6 N6-(2-羟乙基)-腺苷灌胃SGC-7901细胞移植瘤模型裸鼠肿瘤组织的TUNEL染色情况 |
| 7.5 讨论 |
| 7.6 小结 |
| 第8章 以家蚕蛹为替代寄主人工培育“金蚕花”的研究 |
| 8.1 引言 |
| 8.2 实验材料和仪器 |
| 8.2.1 实验材料和试剂 |
| 8.2.2 主要仪器与设备 |
| 8.3 实验方法 |
| 8.3.1 培养基制作 |
| 8.3.2 菌种分离 |
| 8.3.3 菌种纯化 |
| 8.3.4 菌种鉴定 |
| 8.3.5 接种感染蚕蛹 |
| 8.3.6 人工培育 |
| 8.3.7 数据处理和分析 |
| 8.4 结果与分析 |
| 8.4.1 蝉花菌株的分离与纯化 |
| 8.4.2 蝉花菌株的鉴定 |
| 8.4.3 以家蚕蛹为替代宿主人工培育“金蚕花” |
| 8.4.4 接菌时期对“金蚕花”培育的影响 |
| 8.4.5 温度对“金蚕花”培育的影响 |
| 8.4.6 湿度对“金蚕花”培育的影响 |
| 8.5 讨论 |
| 8.6 小结 |
| 第9章 总结与展望 |
| 9.1 全文总结 |
| 9.2 特色与创新 |
| 9.3 问题与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 博士期间取得的科研成果 |
（2）蛹虫草的人工培育及其多糖抗肿瘤活性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 引言 |
| 1.1 蛹虫草概况 |
| 1.1.1 蛹虫草的分类地位 |
| 1.1.2 蛹虫草的分布 |
| 1.1.3 蛹虫草的人工栽培技术 |
| 1.2 蛹虫草化学成分及药理活性 |
| 1.2.1 蛹虫草的主要化学成分 |
| 1.2.2 蛹虫草的药理活性应用 |
| 1.3 多糖的国内外研究进展 |
| 1.3.1 多糖的结构与抗肿瘤活性 |
| 1.3.2 蛹虫草多糖提取工艺 |
| 1.3.3 蛹虫草多糖的结构 |
| 1.4 本研究目的和意义 |
| 1.4.1 研究目的 |
| 1.4.2 研究内容 |
| 1.4.3 技术路线 |
| 第二章 蛹虫草交配系统与营养体亲和性研究 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 供试菌种 |
| 2.1.2 培养基及栽培基质 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 菌株分离及培养 |
| 2.2.2 单子囊孢子的分离与菌株培养 |
| 2.2.3 单子囊孢子交配型鉴定 |
| 2.2.4 交配型分离 |
| 2.2.5 营养亲和性试验 |
| 2.2.6 单子囊孢子菌株菌落特征和实体产生情况的观察 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 菌株分离及培养结果 |
| 2.3.2 单子囊孢子菌株分离结果及交配型鉴定 |
| 2.3.3 蛹虫草单孢子菌株交配型分离 |
| 2.3.4 营养亲和性 |
| 2.3.5 单孢子菌株群落特征 |
| 2.3.6 单孢子菌株产生子实体形态特征 |
| 2.4 讨论 |
| 第三章 不同人工栽培培养基对新疆蛹虫草子实体发育的影响 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 供试材料 |
| 3.1.2 实验方法 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 蛹虫草菌丝生长分析 |
| 3.2.2 蛹虫草子实体生长分析 |
| 3.2.3 蛹虫草子实体经济效益分析 |
| 3.3 讨论 |
| 第四章 蛹虫草多糖提取、纯化和性质研究 |
| 4.1 实验材料、试剂及设备 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 蛹虫草多糖的提取和纯化 |
| 4.2.2 多糖含量测定 |
| 4.2.3 多糖分子量分布 |
| 4.2.4 比旋光度测定 |
| 4.2.5 单糖组成成分分析 |
| 4.2.6 红外光谱(FT-IR)分析 |
| 4.2.7 刚果红实验 |
| 4.2.8 扫描电子显微镜(SEM)分析 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 蛹虫草多糖的提取 |
| 4.3.2 粗多糖分子量分布 |
| 4.3.3 比旋光度测定 |
| 4.3.4 单糖组成成分分析 |
| 4.3.5 刚果红实验结果分析 |
| 4.3.6 FT-IR结果分析 |
| 4.3.7 SEM结果分析 |
| 第五章 蛹虫草多糖抗肿瘤活性研究 |
| 5.1 实验材料、试剂及设备 |
| 5.2 实验方法 |
| 5.2.1 MTT法检测CMPs-4和CMPs-80对Eca109 细胞的生长抑制作用 |
| 5.2.2 CMPs-4对Eca109 细胞形态学的影响 |
| 5.2.3 CMPs-4对Eca109 细胞凋亡的影响 |
| 5.2.4 CMPs-4对Eca109 细胞的周期的影响 |
| 5.2.5 CMPs-4对Eca109 细胞内活性氧含量的影响 |
| 5.2.6 Western blot 法检测 CMPs-4 对 Eca109 细胞凋亡相关蛋白表达水平的影响 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 MTT法检测CMPs-4和CMPs-80对Eca109 细胞增殖的抑制作用 |
| 5.3.2 光学显微镜下观察CMPs-4对Eca109 细胞形态学的影响 |
| 5.3.3 CMPs-4对Eca109 细胞的凋亡作用 |
| 5.3.4 流式细胞仪检测CMPs-4 作用下Eca109 细胞周期的变化 |
| 5.3.5 CMPs-4 作用下Eca109 细胞内活性氧的变化 |
| 5.3.6 CMPs-4 作用下Eca109 细胞内凋亡相关蛋白表达水平 |
| 5.4 讨论 |
| 第六章 结论 |
| 6.1 研究结论 |
| 6.2 本研究的创新点 |
| 6.3 本研究的展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间公开发表论文及着作情况 |
（3）金蝉花粗多糖CP50和CP80的制备和抗肿瘤及抗肝损伤作用初步研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 缩略词英文注释表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 金蝉花的研究进展 |
| 1.1.1 金蝉花简介 |
| 1.1.2 金蝉花的化学成分研究现状 |
| 1.1.3 金蝉花的药理活性研究现状 |
| 1.2 多糖抗肿瘤研究进展 |
| 1.2.1 真菌类多糖的抗肿瘤作用 |
| 1.2.2 植物多糖的抗肿瘤作用 |
| 1.2.3 海洋生物多糖的抗肿瘤作用 |
| 1.3 多糖抗肝损伤作用研究进展 |
| 1.3.1 植物多糖的抗肝损伤作用 |
| 1.3.2 微生物多糖的抗肝损伤作用 |
| 1.3.3 动物多糖的抗肝损伤作用 |
| 1.4 本课题的立项背景和意义 |
| 1.5 本课题主要的研究内容 |
| 第二章 金蝉花粗多糖CP50和CP80 的制备 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验药材 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 主要仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 金蝉花粗多糖的提取 |
| 2.2.2 多糖含量测定 |
| 2.2.3 蛋白质含量测定 |
| 2.2.4 Sevage法脱蛋白处理 |
| 2.3 实验结果与分析 |
| 2.3.1 葡萄糖标准曲线 |
| 2.3.2 蛋白标准曲线 |
| 2.3.3 金蝉花粗多糖脱蛋白的单因素试验结果 |
| 2.3.4 CP50和CP80 的制备结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 金蝉花粗多糖CP50和CP80 抗肿瘤活性比较及机制初步研究 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 实验样品 |
| 3.1.2 实验细胞 |
| 3.1.3 主要试剂 |
| 3.1.4 主要仪器 |
| 3.1.5 主要试剂的配制 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 细胞培养 |
| 3.2.2 实验分组 |
| 3.2.3 CCK-8 法检测金蝉花多糖CP50和CP80对Hela细胞增殖影响 |
| 3.2.4 显微镜观察金蝉花粗多糖CP80对Hela细胞形态的影响 |
| 3.2.5 细胞划痕实验观察金蝉花粗多糖CP80对Hela细胞迁移作用的影响 |
| 3.2.6 DCFH-DA探针法检测金蝉花粗多糖CP80对Hela细胞内活性氧水平的影响 |
| 3.2.7 Western blot法检测金蝉花粗多糖CP80对Hela细胞Bax、Bcl-2 和p53蛋白表达的影响 |
| 3.2.8 金蝉花粗多糖CP80对Hela细胞Bax、Bcl-2和p53 mRNA表达水平的测定 |
| 3.2.9 统计学分析 |
| 3.3 实验结果与分析 |
| 3.3.1 金蝉花粗多糖CP50和CP80对Hela细胞增殖的影响 |
| 3.3.2 金蝉花粗多糖CP80对Hela细胞形态的影响 |
| 3.3.3 金蝉花粗多糖CP80对Hela细胞迁移作用的影响 |
| 3.3.4 金蝉花粗多糖CP80对Hela细胞内活性氧水平的影响 |
| 3.3.5 金蝉花粗多糖CP80对Hela细胞内p53、Bax和 Bcl-2 蛋白表达的影响 |
| 3.3.6 金蝉花粗多糖CP80对Hela细胞内p53、Bax和 Bcl-2mRNA表达的影响 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 本章小结 |
| 第四章 金蝉花粗多糖CP50和CP80 抗环磷酰胺致肝损伤的活性研究 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.1.1 实验动物 |
| 4.1.2 实验仪器 |
| 4.1.3 实验试剂 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 金蝉花粗多糖样品的制备 |
| 4.2.2 环磷酰胺致小鼠肝损伤模型的构建 |
| 4.2.3 动物分组及给药方法 |
| 4.2.4 血清、肝脏生化指标的检测 |
| 4.2.5 数据分析 |
| 4.3 实验结果与分析 |
| 4.3.1 环磷酰胺对小鼠肝损伤模型的构建 |
| 4.3.2 金蝉花粗多糖对肝损伤小鼠肝脏指数的影响 |
| 4.3.4 金蝉花粗多糖对肝损伤小鼠生化指标测定结果 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 本章小结 |
| 第五章 全文总结与展望 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 创新点 |
| 5.3 工作展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 |
（4）猫棒束孢菌丝粉免疫活性及其化学成分研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 综述 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 猫棒束孢真菌的研究进展 |
| 1.3 免疫调节机制研究进展 |
| 1.3.1 对免疫器官的调节作用 |
| 1.3.2 对非特异性免疫的调节作用 |
| 1.3.3 对特异性免疫的调节作用 |
| 1.4 虫草类化学成分分析研究进展 |
| 1.4.1 核苷类成分分析 |
| 1.4.2 氨基酸类成分分析 |
| 1.4.3 糖苷类成分分析 |
| 1.4.4 甾醇类成分分析 |
| 1.4.5 脂肪酸类成分分析 |
| 1.4.6 其他成分分析 |
| 1.5 研究目的意义及主要研究内容 |
| 1.5.1 目的意义 |
| 1.5.2 主要研究内容 |
| 1.5.3 创新点 |
| 第二章 猫棒束孢菌丝粉对免疫抑制小鼠免疫调节作用的研究 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料 |
| 2.2.1 实验动物 |
| 2.2.2 药材 |
| 2.2.3 药品与试剂 |
| 2.2.4 实验仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 菌种培养 |
| 2.3.2 对免疫抑制小鼠体质量增长值、脏器指数、血常规、TNF-α含量的测定 |
| 2.3.3 对免疫抑制小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的测定(碳廓清实验) |
| 2.3.4 对免疫抑制小鼠迟发型变态反应(DTH)的测定 |
| 2.3.5 统计分析 |
| 2.4 结果与分析 |
| 2.4.1 IFMP对免疫抑制小鼠体重的影响 |
| 2.4.2 IFMP对免疫抑制小鼠脏器指数的影响 |
| 2.4.3 IFMP对免疫抑制小鼠血常规检测的影响 |
| 2.4.4 IFMP对免疫抑制小鼠TNF-α含量的影响 |
| 2.4.5 IFMP对免疫抑制小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响 |
| 2.4.6 IFMP对免疫抑制小鼠迟发型变态反应(DTH)的影响 |
| 2.5 结论 |
| 第三章 猫棒束孢菌丝粉多糖的提取及其免疫活性的研究 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料 |
| 3.2.1 实验动物 |
| 3.2.2 药材 |
| 3.2.3 药品与试剂 |
| 3.2.4 实验仪器 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 动物分组及给药 |
| 3.3.2 免疫学指标测定 |
| 3.3.3 统计分析 |
| 3.4 结果与分析 |
| 3.4.1 IFMPP对免疫抑制小鼠体重的影响 |
| 3.4.2 IFMPP对免疫抑制小鼠脏器指数的影响 |
| 3.4.3 IFMPP对免疫抑制小鼠血常规检测的影响 |
| 3.4.4 IFMPP对免疫抑制小鼠溶菌酶含量的影响 |
| 3.4.5 IFMPP对免疫抑制小鼠IL-2 含量的影响 |
| 3.4.6 IFMPP对免疫抑制小鼠TNF-α含量的影响 |
| 3.4.7 IFMPP对免疫抑制小鼠IgG含量的影响 |
| 3.5 结论 |
| 第四章 HPLC-Q-TOF-MS分析猫棒束孢菌丝粉化学成分 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 实验部分 |
| 4.2.1 材料与试剂 |
| 4.2.2 仪器与设备 |
| 4.2.3 实验方法 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 高效液相色谱分离条件的选择 |
| 4.3.2 HPLC-Q-TOF-MS分析结果 |
| 4.4 结论 |
| 第五章 结论与展望 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 展望 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 个人简况及联系方式 |
（5）虫草多糖对X射线辐射损伤小鼠的保护作用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 主要符号对照表 |
| 第1章 引言 |
| 1.1 电离辐射对机体的损伤 |
| 1.2 辐射防护剂研究现状 |
| 1.3 多糖辐射防护作用研究现状 |
| 1.4 虫草多糖的研究进展 |
| 1.4.1 虫草多糖的提取与纯化 |
| 1.4.2 虫草多糖的理化性质、组成及结构分析 |
| 1.4.3 虫草多糖的生物活性 |
| 第2章 发酵冬虫夏草菌粉中多糖的含量测定 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 药物与试剂 |
| 2.1.2 实验仪器 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 供试品溶液的制备 |
| 2.2.2 对照品溶液的制备 |
| 2.2.3 线性关系考察 |
| 2.2.4 精密度 |
| 2.2.5 稳定性 |
| 2.2.6 重复性 |
| 2.2.7 加样回收率 |
| 2.2.8 样品的含量测定 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 线性关系考察 |
| 2.3.2 精密度 |
| 2.3.3 稳定性 |
| 2.3.4 重复性 |
| 2.3.5 加样回收率 |
| 2.3.6 样品的含量测定 |
| 2.4 讨论 |
| 第3章 虫草多糖对X射线辐射损伤小鼠的保护作用 |
| 3.1 材料 |
| 3.1.1 药物与试剂 |
| 3.1.2 实验仪器 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 实验动物 |
| 3.2.2 动物分组 |
| 3.2.3 给药方法 |
| 3.2.4 辐射损伤模型的建立 |
| 3.2.5 存活率测定 |
| 3.2.6 指标测定 |
| 3.2.7 数据统计分析 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 存活率测定 |
| 3.3.2 体重测定 |
| 3.3.3 外周血象测定 |
| 3.3.4 脏器指数测定 |
| 3.3.5 骨髓DNA含量测定 |
| 3.3.6 肝脏组织中抗氧化酶活力及MDA含量的测定 |
| 3.3.7 胸腺及脾脏组织病理形态学观察 |
| 3.4 讨论 |
| 第4章 虫草多糖对X射线辐射损伤小鼠MAPK家族表达的影响分析 |
| 4.1 材料 |
| 4.1.1 药物与试剂 |
| 4.1.2 实验仪器 |
| 4.2 方法 |
| 4.2.1 实验动物 |
| 4.2.2 动物分组 |
| 4.2.3 给药方法 |
| 4.2.4 辐射损伤模型的建立 |
| 4.2.5 ERK1、JNK1和p38 MAPK蛋白表达的测定 |
| 4.2.6 ERK1、JNK1和p38 MAPK m RNA表达的测定 |
| 4.2.7 数据统计分析 |
| 4.3 结果 |
| 4.3.1 ERK1、JNK1和p38 MAPK蛋白表达的测定 |
| 4.3.2 ERK1、JNK1和p38 MAPK m RNA表达的测定 |
| 4.4 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（6）北冬虫夏草多糖抗肿瘤活性研究进展（论文提纲范文）
| 1 北冬虫夏草概述 |
| 2 北冬虫夏草多糖的抗肿瘤作用 |
| 2.1 北冬虫夏草多糖对肝癌细胞生长的影响 |
| 2.2 北冬虫夏草多糖对黑色瘤细胞生长的影响 |
| 2.3 北冬虫夏草多糖对人宫颈癌细胞Hela体外增殖的影响 |
| 2.4 北冬虫夏草多糖对人肿瘤坏死因子α、白细胞介素的影响 |
| 2.5 北冬虫夏草多糖对Eca-109人食管癌细胞的影响 |
| 2.6 北冬虫夏草多糖对人肺癌细胞的影响 |
| 2.7 北冬虫夏草多糖对HT-29人结肠癌细胞的影响 |
| 2.8 北冬虫夏草多糖对人慢性髓系白血病细胞的影响 |
| 2.9 北冬虫夏草多糖对胃癌细胞的影响 |
| 2.1 0 北冬虫夏草多糖对乳腺癌细胞的影响 |
| 3 结语 |
（7）中国冬虫夏草研发70年（论文提纲范文）
| 1 冬虫夏草分布 |
| 1.1 分布特点 |
| 1.2 关键影响因子 |
| 2 冬虫夏草真伪鉴定 |
| 3 冬虫夏草菌 |
| 3.1 培养和产业化 |
| 3.2 群体遗传 |
| 3.3 分子操作 |
| 4 冬虫夏草菌寄主昆虫 |
| 4.1 蝙蝠蛾昆虫分类 |
| 4.2 生物学和人工培育 |
| 4.3 肠道微生物 |
| 4.4 分子操作 |
| 5 冬虫夏草 |
| 5.1 菌群多样性 |
| 5.2 人工培育 |
| 5.3 生物化学与分子操作 |
| 6 冬虫夏草成分 |
| 7 冬虫夏草药效作用 |
| 7.1 抗氧化、抗衰老和抗疲劳 |
| 7.2 抑菌和抗病毒 |
| 7.3 抗炎和抗肿瘤 |
| 7.4 免疫调节 |
| 7.5 动物模型和临床应用 |
| 8 安全性 |
| 9 问题与展望 |
| 9.1 冬虫夏草菌的遗传操作 |
| 9.2 蝙蝠蛾昆虫的生殖调控 |
| 9.3 冬虫夏草菌与蝙蝠蛾昆虫的交互作用 |
| 9.4 冬虫夏草人工培育的智能化 |
| 9.5 冬虫夏草活性成分 |
| 9.6 冬虫夏草与环境的作用 |
| 9.7 保护与利用的协调 |
（8）复方参草菌质颗粒制备工艺及其抗肿瘤活性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略语 |
| 引言 |
| 文献综述 |
| 实验研究 |
| 第一章 参草菌质发酵工艺优化及其质量控制标准研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第二章 复方参草菌质颗粒制备工艺研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法与结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三章 复方参草菌质颗粒抗肿瘤活性研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第四章 复方参草菌质颗粒在A549 细胞中的定量蛋白质组学研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论与小结 |
| 结论 |
| 本文创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间科研成果 |
| 个人简历 |
（9）一株抑制HepG2细胞活性优质蛹虫草菌株MF27的筛选（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 蛹虫草概述 |
| 1.1.1 蛹虫草的生物学特征 |
| 1.1.2 蛹虫草的分类鉴定及遗传多样性 |
| 1.1.3 蛹虫草的化学成分及药理作用 |
| 1.2 蛹虫草的人工培育 |
| 1.2.1 蛹虫草人工培育历史 |
| 1.2.2 蛹虫草的人工培养技术 |
| 1.2.3 蛹虫草人工培育面临的问题 |
| 1.3 蛹虫草优势菌种选育 |
| 1.3.1 子实体高产菌株 |
| 1.3.2 虫草素高产菌株 |
| 1.3.3 虫草多糖高产菌株 |
| 1.4 蛹虫草的抗肿瘤作用 |
| 1.5 研究目的和意义 |
| 1.6 主要研究内容与技术路线图 |
| 1.6.1 主要研究内容 |
| 1.6.2 技术路线图 |
| 1.7 研究特色与创新 |
| 第二章 供试菌株的菌种区别性鉴定 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 材料 |
| 2.1.2 方法 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 ITS序列分析与鉴定 |
| 2.2.2 拆分网络法菌种区别性鉴定 |
| 2.2.3 基于拮抗试验菌种区别性鉴定 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 本章小结 |
| 第三章 供试菌株的种性优势分析 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.1.2 方法 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 固体培养特征分析 |
| 3.2.2 液体培养特征分析 |
| 3.2.3 子实体产量比较 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 本章小结 |
| 第四章 供试菌株菌丝体虫草素含量及抗HepG2活性比较 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 材料 |
| 4.1.2 菌丝体中虫草素的检测方法 |
| 4.1.3 MTT法比较菌丝体提取物抑制HepG2细胞活性 |
| 4.1.4 统计学分析 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 虫草素HPLC检测方法建立 |
| 4.2.2 菌丝体虫草素含量比较 |
| 4.2.3 菌丝体提取物抑制HepG2活性比较 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 本章小结 |
| 第五章 MF27与几种虫生真菌抑制HepG2活性比较 |
| 5.1 材料和方法 |
| 5.1.1 材料 |
| 5.1.2 方法 |
| 5.2 结果与分析 |
| 5.2.1 7个野生虫草的形态学鉴定 |
| 5.2.2 7个野生虫草的ITS序列鉴定 |
| 5.2.3 不同虫草菌丝体粗提物抑制HepG2活性比较 |
| 5.3 讨论 |
| 5.4 本章小结 |
| 第六章 总结与展望 |
| 6.1 总结 |
| 6.2 展望 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的学术论文与研究成果 |
| 致谢 |
（10）冬虫夏草水提液对顺铂增效减毒及体外对A375细胞作用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 侵袭迁移对恶性黑色素瘤的影响 |
| 1.3 国内外冬虫夏草研究现状及分析 |
| 1.3.1 冬虫夏草的形态特征 |
| 1.3.2 冬虫夏草活性成分 |
| 1.3.3 冬虫夏草抗肿瘤研究现状 |
| 1.4 本课题的研究内容、目的及意义 |
| 1.4.1 课题来源 |
| 1.4.2 研究内容 |
| 1.4.3 研究目的及意义 |
| 2 冬虫夏草水提液对顺铂增效减毒作用机制研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 实验材料 |
| 2.2.2 实验方法 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 AECS1和AECS2活性成分组成 |
| 2.3.2 对细胞存活率的影响 |
| 2.3.3 体内增强顺铂对非小细胞肺癌的抗肿瘤作用 |
| 2.3.4 体内减弱顺铂引起的肝肾毒性作用 |
| 2.3.5 对IκBα/NFκB和AKT/MMP2/MMP9通路的影响 |
| 2.4 本章小结 |
| 3 冬虫夏草水提液对化疗药物用于A549斑马鱼移植瘤模型的增效减毒作用 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料与方法 |
| 3.2.1 实验动物 |
| 3.2.2 实验方法 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 AECS1增强顺铂对斑马鱼异种移植模型的抗肿瘤作用 |
| 3.3.2 AECS1对DDP引起斑马鱼胃肠道毒性的影响 |
| 3.3.3 AECS1对DDP引起斑马鱼神经毒性的影响 |
| 3.3.4 AECS1对酒石酸长春瑞滨引起中性粒细胞减少的影响 |
| 3.4 本章小结 |
| 4 冬虫夏草水提液对A375细胞增殖能力的影响 |
| 4.1 引言 |
| 4.1.1 |
| 4.1.2 实验方法 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 冬虫夏草水提液对A375细胞的存活率的影响 |
| 4.2.2 冬虫夏草水提液对A375细胞克隆形成的影响 |
| 4.2.3 冬虫夏草水提液对A375细胞周期分布的影响 |
| 4.2.4 Western blot检测蛋白的表达结果 |
| 4.3 本章小结 |
| 5 冬虫夏草水提液对A375细胞侵袭迁移能力的影响 |
| 5.1 引言 |
| 5.1.1 |
| 5.1.2 实验方法 |
| 5.2 结果与分析 |
| 5.2.1 划痕法检测A375细胞的迁移能力影响 |
| 5.2.2 Transwell法检测A375细胞的迁移能力影响 |
| 5.2.3 Transwell法检测A375细胞的侵袭能力影响 |
| 5.2.4 黏附检测A375细胞的黏附能力影响 |
| 5.2.5 Western blot检测相关蛋白表达结果 |
| 5.3 本章小结 |
| 6 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
四、冬虫夏草抗肿瘤作用的研究进展（论文参考文献）
- [1]蝉花活性成分抗肿瘤作用机制及以蚕蛹为替代寄主人工培育技术的研究[D]. 解鸿青. 浙江大学, 2021(01)
- [2]蛹虫草的人工培育及其多糖抗肿瘤活性研究[D]. 努尔买买提. 东北师范大学, 2020(03)
- [3]金蝉花粗多糖CP50和CP80的制备和抗肿瘤及抗肝损伤作用初步研究[D]. 周红秋. 江苏大学, 2020(02)
- [4]猫棒束孢菌丝粉免疫活性及其化学成分研究[D]. 王跃凤. 山西大学, 2020(01)
- [5]虫草多糖对X射线辐射损伤小鼠的保护作用研究[D]. 杨建鑫. 青海大学, 2020(02)
- [6]北冬虫夏草多糖抗肿瘤活性研究进展[J]. 江志彬,苏思韵,李斌,钟先锋. 农产品加工, 2019(23)
- [7]中国冬虫夏草研发70年[J]. 韩日畴,吴华,陶海平,丘雪红,刘桂清,饶中臣,曹莉. 应用昆虫学报, 2019(05)
- [8]复方参草菌质颗粒制备工艺及其抗肿瘤活性研究[D]. 陈天丽. 长春中医药大学, 2019(03)
- [9]一株抑制HepG2细胞活性优质蛹虫草菌株MF27的筛选[D]. 刘建兵. 福建农林大学, 2018(02)
- [10]冬虫夏草水提液对顺铂增效减毒及体外对A375细胞作用研究[D]. 白雪莲. 哈尔滨商业大学, 2018(12)