问：伪造WB条带可以被看出来吗
- 答：能看出来。
如果没有完全溶解的情况下加牛奶倒膜上，会导致很多不溶性颗粒附着在膜上，这就会导致发光时候膜上的黑点。所以牛奶溶解之后，最好静止一下，然后轻轻地吸取上层牛奶进行封闭，封闭结束之后一定要洗三遍之后再加一抗。
蛋白分子量偏高或者偏低。可能是胶的浓度与目的蛋白的浓度不对应，比如说100KD的蛋白你用12%的胶跑，或者说20KD的蛋白你用6%的胶跑。
蛋白质免疫印迹法 (Western Blot ) ，简称WB ，是指通过SDS-PAGE胶将不同分子量的蛋白质分离开，然后将目标蛋白转移到载体(PVDF)膜上，利用抗原抗体的特异性结合，用特异性的一抗结合目标蛋白，用HRP标记的二抗结合一抗，再加以ECL发光液显色，检测组织或者细胞内某种或者某些特异性蛋白质的表达。蛋白质免疫印迹是做蛋白质分析的一种常规技术，常用于鉴定某种蛋白，并能对蛋白进行定性和半定量分析，还可以用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA相互作用后续分析。
问：放在论文中的WB条带可以不是一块胶上的吗
- 答：放在论文中的WB条带应该不可以不是一块胶上的
尽管WB实验这么玄但有的坑还是可以规避的今天就跟大家分享下WB实验中你一定要避开的“坑”如何拿到漂亮的WB结果！
蛋白质的提取提取蛋白质过程中，应在低温环境下进行，以抑制蛋白酶的水解作用（可加入适合的蛋白酶抑制剂）。
蛋白样品建议分装后冷冻干燥或直接以液体态置-80℃中保存，不要反复冻融。
蛋白浓度低时，可使用超滤膜浓缩或者用真空冻干机将蛋白冻干。
提高跑胶质量的Tips
小电压会使胶的分子筛效应得到充分发挥。电压越小，条带越漂亮，浓缩胶55V，分离胶75V就能跑得很好，但是实验的时间会很长。
胶的均匀度，胶越均匀，条带越窄，分离越均匀。倒胶之前，一定要充分混匀(不要有气泡)，玻璃板一定要干净，双蒸水隔离时，一定要比较轻地加上去，避免稀释上层的分离胶。
问：Image J分析蛋白条带图片（入门1）
- 答：1、打开图片
2、将RGB格式转换为8-bit灰度格式
3、清除背景干扰
一般设置为50.0
4、用矩形选框工具（类似于PS），选择框住要分析的条带
5、点击分析—胶条—选择第一个Lane
6、再次分析—胶条—plot Lanes，出现峰图，一个峰代表一个条带
7、选择直线工具框（如图第5个图标），将每一个峰切割开，就是从峰底画一条直线到底，这样才能计算每个峰的面积
8、选择“魔法棒”工具框（如图第8个图标），依次点击每个峰（点到峰会变黄一下），会有相应的（峰面积）定量值出现。
9、后续分析且看下回
