一、肾细胞癌及尿路移行细胞癌组织中黑色素瘤抗原基因mRNA的表达（论文文献综述）
王爱香[1]（2011）在《FGFR3/P53、H-ras/CD9基因突变检测在判断膀胱癌预后价值中的初步研究》文中进行了进一步梳理目的：探讨膀胱癌两通路发生、发展过程中内在的分子变化规律,为膀胱癌早期诊断、早期预测及个体化治疗提供理论依据。方法：应用RT-PCR或RT-COLD-PCR及直接测序法检测88例膀胱癌及5例正常对照组织FGFGR3Ⅲb/P53、H-ras基因突变状况及CD9mRNA表达水平,并将其与传统临床病理学参数相联系；选取39例CD9表达水平明显降低者检测其CD9基因突变状况；根据随访结果,比较各基因状态与膀胱癌复发之间的关系；应用Logistic回归及相关性分析比较各基因状态在膀胱癌复发中的预测意义及各基因之间的相互关系。结果：1.88例膀胱癌中P53突变率随病理分级的增加而增加,低级别（13.7%）中明显低于低-高级别（60.9%）与高级别（64.3%）；P53突变率随病理分期的增加而增加,pTa（9.8%）中明显低于pT1（51.4%）与≥pT2（66.7%）；突变型P53复发率（46.7%）显着高于野生型P53复发率（22.4%）。2. FGFR3Ⅲb突变率随病理分级的增加而降低,低级别（60.8%）明显高于低-高级别（26.1%）及高级别（14.3%）; FGFR3Ⅲb突变率随病理分期的增加而降低,pTa（61.0%）明显高于≥pT2（16.7%）；野生型FGFR3Ⅲb复发率（40.8%）明显高于其突变型者复发率（17.9%）；低分级、低分期肿瘤中以FGFR3mt/P53wt基因型为主,而高分级、高分期肿瘤以FGFR3wt/P53mt基因型为主,二者之间突变率无相关关系；在所有88例膀胱癌患者中同时检测到两个异构体,一个确认为FGFR3Ⅲb常见,另一个NCBI中将其称为剪接异构体2,缺少外显子8、9及10,因此其蛋白缺乏C端一半的IgⅢ区域及跨膜区。3. H-ras中应用COLD-PCR检测到10个错义突变位点（11.4%）,26个（29.5%）沉默突变位点（c.81T>C,H27H）,与普通PCR相比使突变检测率提高了41.7%；H-ras错义突变的总体突变率为11.4%,主要分布于低分期低级别膀胱癌中,在不同病理分级与分期中其突变率无显着性差异；沉默突变型H-ras中膀胱癌复发率（46.2%）较野生型H-ra者复发率高（24.2%）; H-ras突变率与P53及FGFR3突变率之间无相关关系。4. CD9mRNA表达水平随病理分级增高而降低,低级别（0.81±0.22）显着高于低-高级别（0.49±0.17）与高级别（0.38±0.11）; CD9mRNA表达水平随病理分期增高而降低,pTa期（0.81±0.22）显着高于pT1期（0.58±0.22）与≥pT2期（0.37±0.14）,pT1期显着高于≥pT2期；部分CD9基因突变检测后发现15例存在突变,且突变位点位于CD9蛋白功能区；CD9mRNA表达水平与P53突变率之间呈明显负相关关系与FGFR3突变率之间呈明显正相关；多因素Logistic回归分析表明野生型FGFR3Ⅲb膀胱癌患者的复发危险性是突变型患者复发危险性的3.88倍（P=0.022;95%confidence interval [95%CI],0.081-0.826）,突变型P53膀胱癌患者的复发危险性是野生型患者复发危险性的4.53倍（P=0.020；95%confidence interval [95%CI],1.273～16.110）。结论：1.在低级别及低分期膀胱癌发生、发展中,以FGFR3及H-ras基因突变为主；而在高级别及高分期膀胱癌发生、发展中,以P53基因突变、CD9mRNA表达降低为主；FGFR3与P53基因突变是预测膀胱癌复发的有力指标,P53突变预示膀胱癌预后不良,FGFR3突变预示膀胱癌预后良好。2.低分级、低分期肿瘤中以FGFR3mt/P53wt基因型为主,而高分级、高分期肿瘤以FGFR3wt/P53mt基因型为主,FGFR3与P53基因突变在膀胱尿路上皮癌的发生、发展中分别代表不同的遗传学路径。3.在膀胱癌从低级别向高级别形态学转化过程中其分子遗传学特征与高级别癌相似4. FGFR3剪接异构体2是一种可溶性蛋白,在膀胱癌发生、发展中它可能对FGFR3Ⅲb的功能起重要调节作用5.CD9基因的突变可能是CD9蛋白表达降低或缺失的一种机制,但不是唯一机制。6. COLD-PCR是一种高敏感性、经济、快捷的突变富集方法。7.沉默突变可能在膀胱癌的发生中起重要作用
王丽[2]（2010）在《MAGE-A3、HLA-A1及HLA-A2在食管鳞癌中的表达及其相关性研究》文中指出肿瘤严重危害人类的健康及生命,特别是恶性肿瘤,具有很高的致死率。食管癌发病率占全部恶性肿瘤的1%～2%,仅次于胃癌位居第2位,世界范围内因癌症死亡的病例中,食管癌位居第6位。我国为食管癌高发区,在进入21世纪时,仍有900万居民面临食管癌的威胁,每年约有18万人死于食管癌。目前治疗食管癌的三大传统疗法-外科手术、放疗和化疗各有其局限性,无法根除肿瘤。近年来随着分子生物学和基因工程技术的发展,根据肿瘤生物学特性,以基因免疫治疗为代表的生物治疗方法成为一个重要的研究方向,构成肿瘤尤其是恶性肿瘤综合治疗的重要组成部分。肿瘤基因免疫治疗依赖于细胞免疫和体液免疫两大免疫系统的活化,具有肿瘤高度特异性的特点,对正常细胞及组织几乎不产生损伤。保证免疫治疗成功的关键是发现并鉴定肿瘤特异性抗原,黑色素瘤相关抗原3（melanoma-associated antigens 3, MAGE-A3）作为人类已经发现并鉴定的肿瘤特异性抗原,除了睾丸和胎盘之外的正常组织以及良性肿瘤中不表达外,广泛表达于人体的多种肿瘤组织及细胞,如黑色素瘤、头颈部鳞癌、食管癌,肝癌、肺癌、胃癌、乳腺癌等。人类白细胞抗原（human leukocyte antigen, HLA）是免疫系统中的重要组成部分,参与机体递呈抗原,决定免疫细胞对肿瘤的识别和杀伤,它与肿瘤的关系一直备受关注。HLA-Ⅰ类分子主要捕获细胞内病原体的抗原肽,并递呈给免疫系统。HLA-Ⅱ类分子主要处理外源性抗原。人体内HLA-I类分子可以将MAGE-A3所编码的蛋白中某些多肽递呈于细胞表面,后者可被自体细胞毒性T淋巴细胞（autologous cytotoxic T lymphocyte, CTLs）识别,所以,MAGE-A3是一种CTLs介导的特异性免疫治疗的理想靶分子。在MAGE-A3抗原蛋白上存在许多抗原决定簇,它们可以与不同的HLA-I类分子相结合,诱导产生特异性的CTLs来杀伤MAGE-A3阳性的肿瘤细胞。所以针对肿瘤细胞的特异性细胞免疫治疗的成败与否,在很大程度上取决于HLA-I类分子的参与。效应性T淋巴细胞上的TCR识别并结合HLA-I类分子/MAGE-A3抗原肤复合体后,该细胞才能被有效地激活。在我国HLA-A1和HLA-A2在食管癌患者中具有较高的分布频率,因此,了解MAGE-A3、HLA-A1及HLA-A2分子在食管癌患者中的表达及分布情况,就可以对应用MAGE-A3抗原肽特异性免疫治疗食管癌的可能性及有效性进行估测。材料与方法1.标本收集：本研究共收集60例食管癌组织、30例癌周3cm以内的不典型增生组织及3cm以外的30例正常食管黏膜组织。癌组织经无RNA酶水冲洗以清除可能污染的瘤细胞后,再切取肿瘤组织,常规石蜡包埋,切片,不典型增生组织及正常食管黏膜组织离体40min内迅速放入-80℃冰箱保存。2MAGE-A3基因的表达检测及重组抗原的制备：RT-PCR法检测MAGE-A3在食管癌组织中的表达情况。采用DNA重组技术将MAGE-A3全长cDNA克隆到pET30a（+）载体上,转化为大肠杆菌BL21（DE3）, IPTG诱导表达,经SDS-GAGE和westernblot鉴定后,制备其可溶性蛋白,研究其对T细胞增殖能力的影响。3.HLA-A1和HLA-A2基因的表达：用间接过氧化酶免疫组织化学法对食管癌组织石蜡切片进行检测并综合分析。4.统计学处理：SPSS13.0进行数据整理和分析。对数值变量,首先作正态性和方差齐性检验,符合正态分布和方差齐性条件的作t检验和方差分析,不符合正态分布和方差齐性条件的作非参数检验进行不同组间差异的分析。对分类变量,作χ2检验。检验水准α=0.05。结果1MAGE-A3抗原蛋白表达情况：共提取所有标本蛋白120例。其中癌组织60例,Western blot方法检测发现有21例癌组织为MAGE-A3抗原阳性,阳性率为35.00%。另外还在食管不典型增生组织中发现有2例MAGE-A3表达阳性。成功获得MAGE-A3可溶性蛋白,人T细胞能够对自身抗原呈递细胞加工处理的MAGE-A3蛋白产生应答。2MAGE-A3抗原与与食管癌预后的关系：MAGE-A3抗原阳性（84.20%）的食管鳞癌患者手术后18个月的生存率明显高于其抗原阴性者（57.60%）。3HLA-A1和-A2基因分布情况：食管癌组织中HLA-A1、-A2的阳性率分别为8.33%（56/60）、53.33%（32/60）；食管不典型增生组织中HLA-A1、-A2的阳性率分别为6.66%（2/30）、46.66%（14/30）；正常食管黏膜组织中中HLA-A1、-A2的阳性率分别为3.44%（1/29）、43.33%（13/30）。推测有近19.00%（MAGE-A3/HLA-A2,53.33%、35.00%）的食管癌患者适合MAGE-A3/HLA-A2抗原肽的特异性免疫治疗。4HLA-A1、-A2缺失与食管癌：部分HLA-A1和HLA-A2基因在癌组织中丢失（HLA-A1有1例,HLA-A2有10例）而在不典型增生和正常组织中存在,HLA-A1和-A2的缺失率为18.33%（11/60）。结论1MAGE-A3抗原可作为食管癌早期诊断的表面抗原,有可能成为食管癌患者免疫治疗的靶抗原。2HLA-A1和HLA-A2基因分布情况与文献报道相似,HLA-A2能识别、结合MAGE-A3抗原肽,为MAGE-A3抗原疫苗的研制奠定了基础。3.食管癌早期,适当浓度的特异性MAGE-A3可刺激患者T细胞免疫应答,对食管癌的防治可能有价值。
谢宇[3]（2010）在《Ezrin在膀胱移行细胞癌的表达、作用及机制研究》文中研究说明膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤。Ezrin被研究发现同许多恶性肿瘤的发生、发展、浸润、转移有关。但是ezrin同膀胱移行细胞的作用不清楚,并且未见有用RNAi技术研究ezrin同膀胱移行细胞癌关系的研究。本实验我们首次使用siRNA抑制膀胱移行细胞癌细胞株T24中ezrin基因的表达,研究ezrin在膀胱癌发生、发展、侵袭中的作用.本实验同时探讨了RhoA与ezrin在膀胱癌中的关系。为探讨膀胱癌基因治疗新途径提供理论基础。第一部分膀胱移行细胞癌组织中ezrin、CD44的表达目的探讨ezrin、CD44在膀胱移行细胞癌中的表达与意义方法1、采用免疫组织化学检测60例膀胱移行细胞癌与14例正常膀胱组织中ezrin、CD44的蛋白表达。2、采用RT-PCR方法检测40例膀胱移行细胞癌与10例正常膀胱组织中ezrin、CD44的mRNA表达.结果1、ezrin、CD44在膀胱移行细胞癌组织中的蛋白表达明显高于正常膀胱组织（P<0.05）, ezrin、CD44的蛋白表达与膀胱移行细胞癌组织的病理分级、临床分期密切相关,ezrin、CD44蛋白表达的阳性表达随着膀胱肿瘤病理分级、临床分期的增高而增高（P<0.05）。2、ezrin、CD44在膀胱移行细胞癌组织中的mRNA表达明显高于正常膀胱组织（P<0.05）, ezrin、CD44的mRNA表达与膀胱移行细胞癌组织的病理分级、临床分期密切相关,ezrin、CD44mRNA的阳性表达随着膀胱肿瘤病理分级、临床分期的增高而增高（P<0.05）。3、ezrin、CD44的蛋白表达在膀胱移行细胞癌中有正相关性。结论ezrin、CD44蛋白均在BTCC中表达异常增强,在BTCC发生、发展过程中起重要作用。ezrin可作为诊断、判断预后、指导治疗、随访检测的指标。ezrin基因可能成为BTCC新的治疗靶点。第二部分应用RNAi沉默ezrin基因对膀胱移行细胞癌株生物学行为的影响目的探讨ezrin基因表达与膀胱移行细胞癌株生物学行为的关系。方法1、设计siRNA ezrin,用于干扰并下调T24细胞中目的基因的表达。2、采用RT-PCR以及western-blot方法检测实施siRNA干扰后,T24细胞中ezrin的mRNA以及蛋白量。3、采用绘制细胞生长曲线、MTT实验、流式细胞检测、细胞划痕实验以及细胞迁徙实验、细胞粘附实验,观察siRNA干扰后,细胞生物学行为变化。结果1、设计的siRNA能够很好的对目的基因产生沉默效应。2、转染siRNA后的实验组T24细胞,ezrin的mRNA表达量较对照组明显下调,差异有统计学意义（P<0.05）。ezrin蛋白表达量显着下调,差异有统计学意义。3、转染siRNA后的实验组T24细胞,细胞生长速度较对照组明显减慢,差异有统计学意义（P<0.05）；实验组T24细胞凋亡率为（30.37±8.37）%,实验组细胞凋亡率同空白组、阴性对照组比较,凋亡率明显增加,（p<0.05）。24小时后,实验组T24细胞迁移到划痕区的细胞明显低于空白组和阴性对照组。实验组发生迁移细胞数目明显降低,迁移能力明显下降,与对照组比较差异有显着性（P<0.05）。siRNA干扰可以降低细胞的粘附能力,空白组、阴性对照组、实验组细胞粘附率分别为72.3±5.1%,70.5±5.7%以及39.2±4.6%,差异有统计学意义（p<0.05）结论siRNA可以明显下调T24细胞中ezrin的mRNA以及蛋白表达量,且导致细胞生物学行为的改变,表现为细胞的生长减慢、凋亡增加,细胞的迁移能力及粘附能力降低。第三部分ezrin同RhoA信号传导通路关系的研究目的探讨RhoA及ezrin在膀胱癌中的关系。方法1)EGF作用于膀胱移行细胞癌T24细胞,采用Western-blot检测ezrin、RhoA、磷酸化RhoA的蛋白含量变化。2)将EGF及RhoA激酶抑制剂Y-27632作用于膀胱移行细胞癌T24细胞,检测ezrin、磷酸化RhoA的蛋白含量变化。结果Western-blot结果显示,在给予EGF刺激后,p-RhoA水平逐渐升高,于10、30、60、90min时分别升高了70±11%,250±23%,420±47%以及490±43%。在EGF刺激下RhoA蛋白表达无明显变化。Western-blot结果显示,在给予EGF刺激后,ezrin水平逐渐升高,于8、16、24小时分别升高了170±60%,310±73%,750±47%。用Y-27632预处理T24细胞,EGF诱导的RhoA磷酸化水平明显受到抑制,同时ezrin蛋白表达水平也受到抑制。结论RhoA可能作为ezrin的上游调控元件。
陈立钊[4]（2008）在《功能性抗体库技术分离鉴定肺癌功能性基因的研究》文中研究说明肺癌是严重威胁人类生命与健康的恶性肿瘤,发病率、死亡率均位居第一位。目前治疗肺癌的三大手段仍未能显着降低肺癌的死亡率。分子靶向治疗在临床肿瘤治疗中显示出良好的应用前景,也是目前肿瘤研究的热点。实现分子靶向治疗的前提和关键是获得肿瘤特异表达的功能性靶分子、靶基因。为此,本文采用大容量功能性抗体库技术筛选肺癌功能性单抗,再通过功能性抗体分离鉴定肺癌功能性基因。并探讨功能性基因在肺癌发生发展中所起的作用功能及其分子作用机理。从而为肺癌的靶向治疗提供有价值的分子靶标。第一部分功能性单抗库技术筛选分离、鉴定肺癌功能性抗原基因采用新鲜肺癌组织分离的有核细胞免疫BALB/c小鼠,融合制备库容为1440个克隆的肺癌功能性单克隆抗体库。免疫细胞化学筛选获得377株稳定分泌抗人肺癌细胞单抗的杂交瘤,通过肺正常组织的免疫组化实验,排除271株与正常肺组织阳性反应的单克隆抗体,获得106株识别肺癌组织中抗原的表达高于正常肺组织表达水平的功能性单抗。肺癌及其正常肺组织的配对组织芯片检测证实67株单抗与肺癌组织呈强阳性反应,而与正常肺组织不反应或弱反应。这些单抗识别的抗原有表达于细胞膜的,也有表达于胞浆和/或胞核的。MTT法测定106株肺癌单抗对肺癌细胞增殖生长的影响,发现抑制肺癌细胞增殖生长的单抗57株,其中,抑制率大于20%的单抗有24株,抑制率在15-20%的单抗22株。RT-CESTM系统实时观察106株单抗对肺癌细胞生长的影响,结果显示49株单抗能够显着抑制肺癌细胞的生长,其中16株单抗抑制率在20%以上,20株单抗抑制率在15-20%,其余单抗抑制率在10-15%。106株单抗的亚类分析证明既有不同的重链类和亚类（IgM,IgA,IgG1,IgG2a及IgG2b）,也有不同的轻链型（κ,λ）,表明本研究制备的功能性单抗库有很好的多样性。挑选27株功能单抗进行了裸鼠体内移植瘤抑制实验,结果证实23株单抗在裸鼠体内能显着抑制肺癌的生长和瘤重,其中6株单抗体内抑瘤率在70%以上,8株单抗抑瘤率在50-70%,另外6株单抗抑瘤率在30-50%,其余3株抑瘤率在30%以下,这些结果也提示功能性单抗所识别的抗原基因是功能性基因,具有促进肺癌细胞增殖生长功能。选取其中的5株功能性单抗分离鉴定其功能性抗原蛋白,运用免疫亲和层析和MALDI-TOP-PMF质谱技术鉴定获得了3个肺癌功能基因。单抗1E2识别的抗原基因为氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ（CPS1）,5B8抗体识别的抗原基因为理阿诺碱受体1（RyR1）,13H3抗体所识别的抗原基因为凝集素半乳糖苷结合可溶3结合蛋白基因（LGALS3BP或者Mac-2BP）。第二部分肺癌抗原Mac-2BP基因功能的研究文献报道Mac-2BP在大部分肿瘤组织高表达,但是关于Mac-2BP在肿瘤发生发展中所起的功能作用却很少有研究报道。因此,以Mac-2BP为研究对象,进行多种功能实验研究,揭示Mac-2BP基因在肺癌发生发展中的功能作用及其在临床疾病研究方面的应用价值。采用基因敲降及免疫共沉淀技术验证质谱鉴定结果,证明肺癌功能单抗13H3识别的抗原基因确实为Mac-2BP。应用细胞免疫荧光和免疫细胞化学实验证实Mac-2BP在多种肺癌细胞有较高水平的表达。免疫组化分析105例肺癌病人癌组织及其配对正常肺组织Mac-2BP基因的表达,发现Mac-2BP在肺癌组织的表达显着高于正常肺组织,同时还发现Mac-2BP的表达水平与肺癌患者的癌组织分化程度具有显着相关性,这些结果提示Mac-2BP可作为一种新的肺癌分子标志物,具有临床诊断及预测病人预后状况价值。应用抗体13H3检测分析Mac-2BP基因体外对肺癌细胞增殖、粘附及侵袭迁移功能的影响,未观察到阳性结果,其原因可能是Mac-2BP在所检肺癌细胞体外培养分泌表达蛋白水平及含量太低所致。应用纯化后抗体再次进行体内抑瘤实验,评估抗体对肺癌生长的影响,13H3单抗能显着抑制肺癌移植瘤生长,且具有剂量依赖关系。结果发现其高、中、低剂量的抑制率分别为60.14%、54.86%和43.84%,进一步证明13H3是功能性肺癌单抗,Mac-2BP基因是肺癌功能性基因,它能促进肺癌的增殖生长。为了从基因水平进一步证明Mac-2BP表达在肺癌细胞生长的促进作用,采用RNAi干扰技术敲降肺癌细胞Mac-2BP基因的表达,检测基因敲降前后肺癌细胞增殖、粘附及迁移侵袭的变化。结果证明Mac-2BP基因敲降后肺癌细胞的增殖能力降低38.5%,肺癌细胞与胞外基质collagenⅠ的粘附降低40%,与matrigel粘附降低50%,与FN粘附水平减少35%以上,肺癌细胞体外迁移和侵袭能力分别下降27%和29%。应用稳转shRNA敲降Mac-2BP基因表达的体外功能实验研究也获得了相似的结果。同时,体内抑瘤实验研究结果也表明Mac-2BP基因敲降后,肺癌细胞在裸鼠体内的增殖生长能力显着降低,其对瘤重的抑制率高达80%。基因敲降的体内外功能实验研究再次证明Mac-2BP是一个具有促进肺癌细胞生长增殖、促进与胞外基质粘附和迁移侵袭功能的功能性基因。为了探讨Mac-2BP促进肺癌生长增殖的作用机制,我们测定了Mac-2BP基因敲降后对肺癌细胞细胞周期变化的影响。研究结果发现该基因敲降后,肺癌细胞发生G1期阻滞,致使增殖减慢,进一步研究发现Mac-2BP基因敲降后,抑癌基因p27诱导上调表达。这表明Mac-2BP基因通过调节P27蛋白水平,影响细胞周期进程,从而促进肺癌细胞在体内外的快速增殖和生长。因此该基因具有作为肺癌靶向治疗的一个新的功能性分子靶标的潜力。
殷波[5]（2007）在《人类泌尿系统肿瘤组织中肿瘤—睾丸抗原基因及蛋白的表达情况》文中研究表明目的肿瘤相关抗原是指表达存在于肿瘤组织和正常组织的肿瘤抗原。从治疗的角度来讲，肿瘤相关抗原在肿瘤组织表达丰度越高，在正常组织表达越局限，针对这类抗原进行的免疫治疗效果越显着，其副作用也越小，以防止或减少肿瘤复发。因此具有显着组织表达限制性的肿瘤相关抗原成为疫苗研发的主要靶点，尤其是肿瘤睾丸抗原（cancer-testis antigens，CT）。CT抗原的特点是表达局限于肿瘤，睾丸，和/或胎盘及胎儿卵巢，在其他正常组织不表达或只有很微弱表达。近年来许多研究表明，CT抗原基因编码的肿瘤相关抗原在许多肿瘤组织中有较高的表达，同时在除睾丸和胎盘外的正常组织均不表达，是特异性免疫治疗的理想靶分子，因此CT抗原已成为多肽疫苗研发的最有希望的一类抗原。若能成功筛选出在人类泌尿系统肿瘤中高度表达且具有显着组织限制性的CT基因，可以选择其中高表达的2～3种基因用于联合DNA疫苗的研究。现在公认，两种以上的基因联合转染疫苗可以改进肿瘤的免疫治疗，有利于机体免疫系统针对不同的抗原表位的刺激产生有效的、广谱的保护性免疫反应。联合疫苗大大扩展了癌症疫苗的应用范围，是今后疫苗研究、治疗的发展方向。膀胱肿瘤是我国发病率最高的泌尿系统肿瘤，其中移行细胞癌约占90％。尽管大部分膀胱肿瘤可以通过手术得到治疗，然而膀胱癌的高复发率经常使病人感到沮丧。因此，如何有效的预防膀胱肿瘤的复发已成为泌尿外科迫切解决的重要问题。免疫治疗在膀胱癌的术后辅助治疗中占据着重要地位。肾癌也是泌尿系统常见的恶性肿瘤之一，发病率仅次于膀胱癌。目前，25～40％的肾癌为偶发肾癌，25～30％的病人在初次诊断时就已经发生了明显的转移，一些病人发生了亚临床转移。手术是治疗肾癌的主要方法，由于肾癌对放疗和化疗均不敏感，免疫治疗一直是公认的主要的的术后辅助治疗方法。肿瘤的特异性免疫治疗一直是肿瘤免疫治疗研究的热点，然而长期以来，引发这种特异性抗肿瘤免疫的肿瘤相关抗原却很少被克隆出来，使多肽疫苗的研发受到限制。而CT抗原的发现给膀胱移行细胞癌和肾透明细胞癌的临床免疫治疗带来了新的希望。本研究主要探讨人类泌尿系统肿瘤组织中肿瘤-睾丸抗原基因及蛋白产物的表达情况。本论文主要可分为三部分：①筛选出在人类泌尿系统肿瘤中高度表达且具有显着组织限制性的CT基因，即应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法对人肾透明细胞癌和膀胱移行细胞癌组织中cTAGE-1、cTAGE-2、MAGE-A1、MAGE-A3、MAGE-A12及NY-ESO-1等6种CT基因的表达情况进行检测；②进一步检测具有高表达率CT基因蛋白产物在泌尿系统肿瘤组织中的表达情况，即采用Western blot法检测上述组织中MAGE-A3蛋白的表达；③探讨CT基因及其蛋白产物的表达与泌尿系统肿瘤临床病理特性之间的关系。方法一、实验材料（一）标本选取我院2006年6月至2006年12月收治的肿瘤患者77例，均经病理证实。其中男性46例，女性31例，年龄21～88岁，平均56.7岁。其中肾透明细胞癌42例；膀胱移行细胞癌35例。对其中20例患者取距癌组织5cm以上的癌旁组织作为对照，其中肾癌14例，膀胱癌6例。新鲜肿瘤组织及癌旁组织被制成直径约5mm的组织块，在手术切除后10min内放入液氮中保存，之后置入-70℃深低温冰箱内保存。（二）主要试剂：1、RT-PCR实验（1）总RNA提取试剂（TRIzol Reagent）；（2）RT-PCR试剂盒。2、Western blot实验MAGE-A3鼠单克隆抗体（6C1）；考马斯亮蓝蛋白定量试剂盒；碱性磷酸酶标记的羊抗鼠IgG；硝酸纤维素膜；琼脂糖；DNA电泳缓冲液（TBE）、十二烷基磺酸钠（SDS）、三羟甲基氨基甲烷（Tris）等其他试剂。3、主要仪器设备UV1201型紫外分光光度计、PTC-100 TM型PCR扩增仪、HERMEL-2283 K型低温高速离心机、G：Box（SYNGENE）凝胶成像分析系统、电泳仪BIO-RAD POWER PAc 3000、半干转印仪BIO-RAD semidry Transfer System等。二、实验方法1、RT-PCR法检测mRNA，按说明书操作提取RNA，引物设计如下：cTAGE-1上游引物5′-GGAGACCTACCGAAAGCG-3′，下游引物5′-TCAGATGAAGGCCAACCC-3′；cTAGE-2上游引物5′-GGAGACCTACCGAAAGcG-3′，下游引物5′-TCAGATGAAGGCCAACCC-3′；MAGE-A1上游引物5′-GGAGCACCAAGGAGAAGA-3′，下游引物5′-TGATGGTAGTGGGAAAGG-3′；MAGE-A3上游引物5′-AGTCCGAGTTCCAAGCAG-3′，下游引物5′-GCAGGTGGCAAAGATGTA-3′：MAGE-A12上游引物5′-GGAAGATGGCTGAGTTGG-3′，下游引物5′-AGGCAGGTGACAAGGATG-3′；NY-ESO-1上游引物5′-GAGCCGCCTGCTTGAGTT-3′，下游引物5′-AGCACTGCGTGATCCACATC-3′；β-actin上游引物5′-GTGGGGCGCCCCAGGCACCA-3′，下游引物5′-CTCCTTAATGTCACGCACGATTTC-3′。逆转录合成cDNA，聚合酶链反应，PCR产物电泳及检测，阳性标准为相应碱基对区出现明显条带影。2、Western blot法检测MAGE-A3蛋白，组织细胞匀浆和蛋白提取，蛋白定量电泳，转印，杂交及显色，实验结果经自动电泳凝胶成像分析采集。三、统计学方法采用SPSS 11.5软件包进行统计学处理，计数资料采用Fisher确切概率法或Pearson)χ2检验法进行统计学分析结果1、膀胱移行细胞癌组织中CT基因mRNA的表达：35例膀胱移行细胞癌组织100％（35/35）至少表达6种CT基因中一种，6例癌旁组织表达均阴性。膀胱移行细胞癌组织中MAGE-A12表达最高，其次为MAGE-A1，cTAGE-1，MAGE-A3，cTAGE-2及NY-ESO-1，分别为69％（24/35），60％（21/35），57％（20/35），54％（19/35），51％（18/35）及46％（16/35）。肿瘤不同分期、不同分级之间6种CT基因的表达差异均无统计学意义（Fisher确切概率法，P>0.05）。2、肾透明细胞癌组织中CT基因mRNA的表达：42例肾透明细胞癌组织中100％（42/42）至少表达6种CT基因中一种，14例癌旁组织表达均阴性。肾透明细胞癌组织中MAGE-A12表达最高，其次为MAGE-A3，MAGE-A1，cTAGE-1，cTAGE-2及NY-ESO-1，分别为71％（30/42），70％（29/42），66％（28/42），65％（27/42），60％（25/42）及50％（20/42）。肿瘤不同分期、不同分级之间6种CT基因的表达差异均无统计学意义（Pearsonχ2检验法，P>0.05）。3、膀胱移行细胞癌组织中MAGE-A3蛋白的表达：35例膀胱移行细胞癌组织中MAGE-A3蛋白表达的阳性率为45.7％（16/35），10例癌旁组织表达均阴性。肿瘤不同分期、不同分级之间MAGE-A3蛋白的表达差异均无统计学意义（Fisher确切概率法，P>0.05）。结论1、本研究应用RT-PCR技术检测了35例膀胱移行细胞癌和42例肾透明细胞癌组织中6种CT基因mRNA的表达情况，发现阳性表达率相当高，而在癌旁正常组织不表达。其中MAGE-A12表达率最高，而且100％至少表达一种CT基因。2、本研究表明，肿瘤的不同分期间、不同分级间，CT基因mRNA的阳性表达的差异无显着性意义。3、本研究应用Western blot技术检测了35例膀胱移行细胞癌组织中MAGE-A3蛋白的表达情况，发现阳性表达率相当高，而在癌旁正常组织不表达。MAGE-A3蛋白的阳性表达与肿瘤的分期、分级无关。4、中国人膀胱移行细胞癌和肾透明细胞癌组织中6种CT基因mRNA高表达及膀胱移行细胞癌组织中MAGE-A3蛋白高表达，提示CT基因产物作为肿瘤特异性抗原诱导膀胱移行细胞癌和肾透明细胞癌进行特异性免疫治疗可能取得较好的疗效。而CT基因检测阳性的患者，可能就是以后适宜进行CT特异性免疫治疗的患者。
蒋燕明[6]（2005）在《卵巢癌相关抗原的筛选及鉴定》文中研究指明肿瘤抗原的寻找一直是肿瘤免疫学研究中面临的重要课题。Sahin 报告的SEREX（Serological analysis of recombinant eDNA expression libraries）方法是从体液免疫的角度寻找肿瘤抗原,为寻找肿瘤抗原提供了一种全新的途径。以应用于许多类型的肿瘤抗原的筛选,发现了一些新的肿瘤排斥抗原,显示出该方法具有良好的应用前景。卵巢癌在女性恶性肿瘤中死亡率居于第一位,其中最常见的晚期上皮性卵巢癌5 年生存率长期停留在20～30%左右,其主要原因是卵巢癌发病部位隐蔽,难以早发现,早治疗,预后差。目前的诊断方法有限,寻找新的更具优势的肿瘤抗原用于诊断是急需研究的课题。用SEREX 方法筛选卵巢癌肿瘤抗原的研究在国内外较少。本研究所用卵巢癌eDNA 表达文库由本课题组构建,该文库已应用SEREX 和SSH 相结合的筛选肿瘤抗原基因的技术策略,并获得了180 个卵巢癌肿瘤抗原基因克隆。本文对其中45 个卵巢癌候选抗原基因在34 例卵巢癌患者和34 例正常人血清中相应IgG,IgM 抗体的检测、分析发现,其中6 个抗原克隆的IgG 血清抗体的阳性率均明显的高于相应正常人血清中的阳性率,4 个抗原克隆的IgM 血清抗体的阳性率均明显的高于相应正常人血清中的阳性率。分析筛选的阳性卵巢癌抗原与卵巢癌患者的临床病理关糸发现,lO 个卵巢癌抗原在卵巢癌血清中的自身抗体与其病理学类型及组织学分级无相关性。分析这些抗原的自身IgG抗体与卵巢癌临床分期的关系发现,不同抗原的抗体在卵巢癌的不同期别可发生明显的升高。这些结果说明卵巢癌的发生是一个多阶段、多步骤、多基因参与的过程。我们的研究发现数个卵巢癌抗原的血清IgM 抗体在卵巢癌早期阶段就发生了明显的升高,提示这些肿瘤抗原的自身抗体可能成为卵巢癌早期诊断的血清学标志物。本研究把10 个抗原克隆联合起来分析发现,分别用IgG 抗体和IgM 抗体检测都能提高卵巢癌诊断的敏感性和特异性:而同时用IgG 抗体和IgM 抗体检测,则能够在保证特异性不变的前提下,明显提高了诊断的敏感性和准确性。这个发现为将来研究卵巢癌肿瘤标志物,用以诊断卵巢癌提供了一个新的方向。得到的其中7 个阳性克隆的序列进行生物信息学分析,经与GeneBank 和SEREX 数据库比较、分析发现这7 个卵巢癌候选肿瘤抗原基因可以分为4 类:①1 个与已知卵巢癌相关基因同源的基因,可能是乳腺癌或卵巢癌癌性突变的靶位;②3 个与一些具特殊功能蛋白的基因同源的基因:③2 个可能与细胞生长、分化功能有关的基因;④1 个在GeneBank 中无同源序列的新基因。初步分析这些基因均是具有不同功能的功能性基因。
杜鹏,俞莉章,马鸣,耿凛,王晓松,辛殿祺,那彦群[7]（2005）在《SSX2基因mRNA在泌尿系统肿瘤组织中的表达》文中认为目的 探讨肿瘤特异性SSX基因mRNA在肾细胞癌及尿路移行细胞癌组织中的表达。方法 采用逆转录聚合酶链反应方法,检测 26例肾细胞癌患者、27例尿路移行细胞癌患者的癌组织,及 15例患者相应的癌旁组织中SSX2 基因mRNA的表达。结果 26例肾癌患者癌组织中, 18例（69% ）SSX2基因mRNA表达阳性; 27例尿路移行细胞癌组织中, 22例 （ 81% ）SSX2基因mRNA表达阳性。癌旁组织均不表达。在肿瘤不同分期之间及不同分级之间SSX2基因mRNA的表达差异均无统计学意义（P均>0 05）。结论 SSX2 基因mRNA在肾癌及尿路移行细胞癌组织中高表达。
马鸣,俞莉章,那彦群,耿凛,李鸿伟,杨新宇,王莹,丁义,潘柏年[8]（2004）在《肾及膀胱肿瘤组织中MAGE基因及其产物的表达》文中研究表明目的 :观察肿瘤特异性抗原MAGE 1、MAGE 3基因及MAGE 3抗原在肾及膀胱肿瘤组织中的表达状况 ,以评价这些基因或基因产物作为肾及膀胱肿瘤组织中的免疫学检测和免疫治疗、基因治疗分子标志物的可行性。方法 :应用逆转录 聚合酶链反应 （RT PCR）的方法分别测定 39例肾及膀胱肿瘤患者癌组织与 1 0例相应的癌旁组织MAGE 1、MAGE 3基因。应用免疫组织化学方法测定 1 2 1例肾及膀胱肿瘤患者癌组织与 1 0例相应的癌旁组织MAGE 3抗原表达。结果 :39例肾及膀胱肿瘤中有 2 3例MAGE 1mRNA呈阳性表达 （5 9.0 % ） ,有 2 2例MAGE 3mRNA呈阳性表达 （5 6 .4 % ） ,其中肾细胞癌 1 4例中MAGE 1mRNA及MAGE 3mRNA阳性表达均为 8例。肾盂与膀胱移行细胞癌 2 5例中MAGE 1mRNA及MAGE 3mRNA阳性表达分别为 1 5例及 1 4例。同时表达MAGE 1及MAGE 3的肾及膀胱肿瘤为 1 8例 （4 6 .2 % ） ,所有 1 0例癌旁组织均不表达MAGE 1及MAGE 3。免疫组织化学检测 1 2 1例肾及膀胱肿瘤中 5 6例MAGE 3抗原表达阳性 （4 6 .3% ） ,包括肾细胞癌 1 3例 ,MAGE 3抗原表达率为 30 .8% ;肾盂与膀胱移行细胞癌 1 0 8例 ,MAGE 3抗原表达率为 4 8.1 %。 1 0例相应的癌旁组织MAGE 3抗原均不表达。根据Logistic回归检验分析MAGE 3抗原的表达与患者的临床分期及
马鸣,俞莉章,李鸿伟,王莹,潘柏年,那彦群[9]（2004）在《肾细胞癌及尿路移行细胞癌组织中黑色素瘤抗原基因mRNA的表达》文中进行了进一步梳理目的 评价肿瘤特异性黑色素瘤抗原 （MAGE） 1、 3基因作为肾细胞癌及尿路移行细胞癌组织中的免疫学检测和免疫治疗、基因治疗分子标志物的可行性。 方法 肾细胞癌组织标本 18例 ,尿路移行细胞癌组织标本 2 6例 ,相应的癌旁组织 10例 ,采用RT PCR方法对MAGE 1、MAGE 3基因进行测定。 结果 18例肾癌组织中MAGE 1mRNA阳性表达 10例 （5 6 % ） ,MAGE 3mRNA阳性表达11例 （6 1% ） ,MAGE 1及MAGE 3同时表达 8例 （44 % ） ;2 6例尿路移行细胞癌组织中MAGE 1mRNA阳性表达 16例 （6 2 % ） ,MAGE 3mRNA阳性表达 15例 （5 8% ） ,MAGE 1及MAGE 3同时表达 12例 （46 % ）。癌旁组织 10例均不表达MAGE 1及MAGE 3。 结论 MAGE 1、MAGE 3基因有可能作为肾癌及尿路移行细胞癌组织免疫学检测的分子标志物 ,并且具有作为免疫治疗、基因治疗特异性靶位的潜在价值。
张翼鹏,廖红[10]（2008）在《肿瘤相关性抗原MAGE家族的研究现状》文中指出
二、肾细胞癌及尿路移行细胞癌组织中黑色素瘤抗原基因mRNA的表达（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、肾细胞癌及尿路移行细胞癌组织中黑色素瘤抗原基因mRNA的表达（论文提纲范文）
（1）FGFR3/P53、H-ras/CD9基因突变检测在判断膀胱癌预后价值中的初步研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语/符号说明 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 一、FGFR3及P53的突变检测 |
| 1.1 对象和方法 |
| 1.1.1 主要试剂、仪器设备 |
| 1.1.2 对象 |
| 1.1.3 方法 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 组织总RNA提取 |
| 1.2.2 P53及FGFR3 PCR扩增结果 |
| 1.2.3 膀胱癌新病理分级的组织形态学特征 |
| 1.2.4 病例的随访结果 |
| 1.2.5 P53、FGFR3两种异构体在正常及膀胱癌组织中的测序结果 |
| 1.2.6 P53、FGFR3Ⅲb在膀胱癌及正常对照中的突变情况 |
| 1.2.7 膀胱癌中P53、FGFR3Ⅲb突变率之间的相关关系 |
| 1.2.8 膀胱癌中各分级及分期间P53、FGFR2Ⅲb突变的基因分布类型 |
| 1.2.9 膀胱癌中P53、FGFR3Ⅲb基因突变情况 |
| 1.3 讨论 |
| 1.3.1 两类癌的发展及概述 |
| 1.3.2 P53概述 |
| 1.3.3 P53与膀胱肿瘤 |
| 1.3.4 FGFR3概述 |
| 1.3.5 FGFR3与膀胱肿瘤 |
| 1.3.6 FGFR3与P53的关系 |
| 1.4 小结 |
| 二、应用COLD-PCR技术检测H-ras基因突变 |
| 2.1 对象和方法 |
| 2.1.1 主要试剂、仪器设备 |
| 2.1.2 对象 |
| 2.1.3 方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 H-ras基因普通PCR与COLD-PCR结果 |
| 2.2.2 H-ras基因普通PCR与COLD-PCR测序结果 |
| 2.2.3 膀胱癌中H-ras基因错义突变与临床病理学参数之间的关系 |
| 2.2.4 膀胱癌中野生型与错义突变型H-ras基因复发率的比较 |
| 2.2.5 膀胱癌中H-ras基因沉默突变与临床病理学参数之间的关系 |
| 2.2.6 膀胱癌中野生型与沉默突变型H-ras基因复发率的比较 |
| 2.2.7 膀胱癌中H-ras基因错义突变率与沉默突变率的相关性比较 |
| 2.2.8 膀胱癌中H-ras基因错义突变率与FGFR3Ⅲb相关性比较 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 H-ras概述 |
| 2.3.2 COLD-PCR概述 |
| 2.3.3 H-ras与膀胱肿瘤 |
| 2.3.4 沉默突变与癌症 |
| 2.4 小结 |
| 三、CD9mRNA表达及基因突变的检测 |
| 3.1 对象和方法 |
| 3.1.1 主要试剂、仪器设备 |
| 3.1.2 对象 |
| 3.1.3 方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 CD9基因RT-PCR扩增结果 |
| 3.2.2 膀胱癌中CD9基因RT-PCR突变检测结果 |
| 3.2.3 膀胱癌中不同病理分级及分期间CD9mRNA表达水平 |
| 3.2.4 CD9mRNA表达水平与其它临床病理学参数的比较 |
| 3.2.5 CD9mRNA表达水平在膀胱癌复发组与未复发组间的比较 |
| 3.2.6 CD9mRNA表达水平与P53、FGFR3Ⅲb及H-ras之间的相关性比较 |
| 3.2.7 膀胱癌复发的多因素非条件Logistic回归分析 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 CD9基因概述 |
| 3.3.2 CD9基因与膀胱肿瘤 |
| 3.3.3 CD9基因突变的研究 |
| 3.4 小结 |
| 全文结论 |
| 论文创新点 |
| 问题与展望 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参加科研情况说明 |
| 综述 |
| 膀胱癌分子遗传学：诊断及治疗的靶点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（2）MAGE-A3、HLA-A1及HLA-A2在食管鳞癌中的表达及其相关性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 论文部分 MAGE-A3、HLA-A1及HLA-A2在食管鳞癌组织中的表达及其相关性研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述部分 肿瘤相关性抗原MAGE研究现状与展望 |
| 参考文献 |
| 硕士期间所发表的文章 |
| 英文缩略词索引 |
| 致谢 |
（3）Ezrin在膀胱移行细胞癌的表达、作用及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 膀胱移行细胞癌组织中ezrin、CD44的表达与膀胱癌的关系 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 第二部分 应用RNAi沉默ezrin基因对膀胱移行细胞癌株生物学行为的影响 |
| 第一节 ezrin小干扰RNA设计、合成和筛选 |
| 材料 |
| 方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 第二节 siRNA干扰人膀胱移行细胞癌T24细胞ezrin表达的实验研究 |
| 材料 |
| 方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 第三节 ezrin siRNA对人膀胱移行细胞癌细胞T24生物学行为的影响 |
| 材料 |
| 方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 第三部分 ezrin同RhoA信号传导通路关系的研究 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 总结 |
| 参考文献 |
| 综述一 |
| 综述二 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间主要研究成果 |
（4）功能性抗体库技术分离鉴定肺癌功能性基因的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 文献综述 |
| 论文前言 |
| 第一部分 功能性单抗库技术筛选分离鉴定肺癌功能性抗原基因 |
| 研究技术路线 |
| 材料和方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 第二部分 肺癌抗原Mac-2BP基因功能的研究 |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录一 参加会议及文章 |
| 附录二 105例肺癌配对标本免疫组化Mac-2BP检测结果 |
| 附录三 76例肺癌配对标本组织芯片免疫组化Mac-2BP检测结果 |
（5）人类泌尿系统肿瘤组织中肿瘤—睾丸抗原基因及蛋白的表达情况（论文提纲范文）
| 一、摘要 |
| 中文论着摘要 |
| 英文论着摘要 |
| 二、英文缩略语 |
| 三、论文 |
| 论文一、肿瘤-睾丸抗原基因在人类泌尿系统肿瘤组织中表达情况的实验研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果(附论文图表) |
| 论文二、膀胱移行细胞癌组织中MAGE-A1、MAGE-A3及MAGE-A12基因及蛋白的表达 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果(附论文图表) |
| 讨论 |
| 结论 |
| 四、本研究创新性的自我评价 |
| 五、参考文献 |
| 六、附录 |
| 综述 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（6）卵巢癌相关抗原的筛选及鉴定（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 主要英文缩写 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一章:前言(文献综述) |
| 1 卵巢癌流行病及病因学 |
| 2 卵巢癌病理分子生物学 |
| 2.1 癌基因 |
| 2.2 抑癌基因 |
| 2.3 信号传递糸统 |
| 3 卵巢癌诊断及病程监测概述 |
| 3.1 卵巢癌诊断 |
| 3.2 卵巢癌病程监测概述 |
| 4 卵巢癌治疗概况 |
| 4.1 卵巢癌的手术治疗 |
| 4.2 卵巢癌化学药物治疗的现状 |
| 5 卵巢癌相关的免疫学研究进展 |
| 5.1 肿瘤抗原 |
| 5.2 抗卵巢癌免疫的效应机理 |
| 5.3 卵巢癌的免疫监视及逃逸分子机理 |
| 5.4 卵巢癌患者免疫功能的变化 |
| 5.5 卵巢癌的免疫治疗现况 |
| 6 本研究的前期工作基础、目的与意义 |
| 第二章:卵巢癌相关抗原的异体血清筛选 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第三章:筛选出的卵巢癌抗原的相关生物信息学分析 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第四章:多拷贝毕赤酵母表达载体的改造 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第五章:Ocy-100 抗原基因的克隆与表达 |
| 1 前言 |
| 2 实验材料 |
| 3 实验方法 |
| 4 结果 |
| 5 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
（7）SSX2基因mRNA在泌尿系统肿瘤组织中的表达（论文提纲范文）
| 资料与方法 |
| 一、标本来源 |
| 二、方法 |
| 1.RNA提取及逆转录: |
| 2.SSX2、β肌动蛋白 (β-actin) 基因的PCR扩增: |
| 三、统计学方法 |
| 结果 |
| 一、肾细胞癌及尿路移行细胞癌组织中SSX2基因mRNA的表达 |
| 二、不同分期、分级肿瘤组织中SSX2基因mRNA的表达 |
| 讨论 |
（8）肾及膀胱肿瘤组织中MAGE基因及其产物的表达（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 RT-PCR的标本来源 |
| 1.2 RT-PCR |
| 1.2.1 引物的设计 |
| 1.2.2 RNA提取, 逆转录反应 |
| 1.2.3 MAGE-1、MAGE-3、β-actin基因的PCR扩增 |
| 1.3 免疫组化的标本来源 |
| 1.4 LSAB免疫组化法 |
| 1.4.1 试剂 |
| 1.4.2 方法 |
| 1.4.3 结果判断 |
| 1.5 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 MAGE-1、MAGE-3基因在肾及膀胱肿瘤中的表达 |
| 2.2 MAGE-3 抗原在肾及膀胱肿瘤中的表达 |
| 2.3 MAGE基因及基因产物在肾及膀胱肿瘤中的表达与肿瘤的分期及分级关系 |
| 2.4 统计学分析结果 |
| 3 讨论 |
（9）肾细胞癌及尿路移行细胞癌组织中黑色素瘤抗原基因mRNA的表达（论文提纲范文）
| 材料与方法 |
| 一、标本来源 |
| 二、方法 |
| 1.RNA提取及逆转录: |
| 2.MAGE-1、-3、β-actin基因的PCR扩增 |
| 3.统计学方法: |
| 结 果 |
| 讨 论 |
（10）肿瘤相关性抗原MAGE家族的研究现状（论文提纲范文）
| 1 MAGE基因家族的发现、结构及定位 |
| 2 MAGE基因的表达 |
| 2.1 MAGE基因水平的表达 |
| 2.2 MAGE蛋白水平的表达 |
| 3 MAGE基因的作用 |
| 4 MAGE基因的临床应用 |
| 4.1 MAGE基因与肿瘤特异性免疫治疗 |
| 4.2 肿瘤的检测、监测和预后判断 |
四、肾细胞癌及尿路移行细胞癌组织中黑色素瘤抗原基因mRNA的表达（论文参考文献）
- [1]FGFR3/P53、H-ras/CD9基因突变检测在判断膀胱癌预后价值中的初步研究[D]. 王爱香. 天津医科大学, 2011(01)
- [2]MAGE-A3、HLA-A1及HLA-A2在食管鳞癌中的表达及其相关性研究[D]. 王丽. 郑州大学, 2010(06)
- [3]Ezrin在膀胱移行细胞癌的表达、作用及机制研究[D]. 谢宇. 中南大学, 2010(11)
- [4]功能性抗体库技术分离鉴定肺癌功能性基因的研究[D]. 陈立钊. 中国协和医科大学, 2008(07)
- [5]人类泌尿系统肿瘤组织中肿瘤—睾丸抗原基因及蛋白的表达情况[D]. 殷波. 中国医科大学, 2007(06)
- [6]卵巢癌相关抗原的筛选及鉴定[D]. 蒋燕明. 广西医科大学, 2005(05)
- [7]SSX2基因mRNA在泌尿系统肿瘤组织中的表达[J]. 杜鹏,俞莉章,马鸣,耿凛,王晓松,辛殿祺,那彦群. 中华外科杂志, 2005(06)
- [8]肾及膀胱肿瘤组织中MAGE基因及其产物的表达[J]. 马鸣,俞莉章,那彦群,耿凛,李鸿伟,杨新宇,王莹,丁义,潘柏年. 北京大学学报(医学版), 2004(02)
- [9]肾细胞癌及尿路移行细胞癌组织中黑色素瘤抗原基因mRNA的表达[J]. 马鸣,俞莉章,李鸿伟,王莹,潘柏年,那彦群. 中华泌尿外科杂志, 2004(01)
- [10]肿瘤相关性抗原MAGE家族的研究现状[J]. 张翼鹏,廖红. 中国厂矿医学, 2008(02)