一、视上核大神经内分泌细胞的电生理学进展（论文文献综述）
张斌斌[1]（2020）在《大鼠下丘脑室旁核神经分泌大细胞谷氨酸能突触传递长时程可塑性机制研究》文中研究指明[目的]下丘脑室旁核（paraventricular nucleus,PVN）是由神经分泌大细胞、神经分泌小细胞和自主神经元组成的多功能核团,是下丘脑-垂体-肾上腺轴应激反应的重要整合部位。来自不同脑区的兴奋性谷氨酸能纤维投射到下丘脑室旁核,与神经分泌大细胞（MNCs）形成突触联系,调控MNCs功能活动,并在一定条件下发生可塑性变化,对MNCs功能活动产生长时程调控作用。此外,应激刺激可以影响MNCs的谷氨酸能突触传递及长时程可塑性的形成,但迄今为止,下丘脑室旁核MNCs的兴奋性谷氨酸能突触长时程可塑性的发生机制还不清楚,长期应激对长时程可塑性的影响尚不明确。因此,本研究应用脑片全细胞膜片钳记录结合单细胞RT-mPCR技术,组织化学及神经药理学等手段,研究应激与非应激条件下大鼠下丘脑室旁核MNCs谷氨酸能突触传递长时程可塑性的诱发机制,探讨应激对下丘脑室旁核MNCs谷氨酸能突触传递长时程可塑性的影响。[方法]（1）非应激大鼠MNCs的长时程可塑性诱导:本部分实验采用出生12-14天的Wistar 雄性大鼠,异氟烷适度吸入麻醉后,迅速断头取脑,用振动切片机制备厚度为250 μm的含有下丘脑室旁核（PVN）的冠状脑片。脑片置于室温的氧饱和（95%02,5%C02）人工脑脊液中孵育1 h以上进行电生理记录。在电压钳下,采用配对电刺激（0.2 ms,10-100 μ A,刺激间隔:50 ms）的方式诱导下丘脑室旁核MNCs的兴奋性突触后电流（evoked EPSCs）并将两个振幅标注为N1和N2。待EPSCs稳定十分钟,利用高频电刺激（100 Hz,100 pulses,3 times）诱导下丘脑室旁核MNCs兴奋性输入的长时程可塑性。通过Axopatch 700B膜片钳放大器及Clampex10.4软件记录并分析电刺激前后神经分泌大细胞的兴奋性突触后流的振幅和配对脉冲比（PPR）的变化情况。电生理记录结束后收集内液进行单细胞RT-mPCR鉴定,确定所记录细胞的分泌类型。脑片用福尔马林固定,进行组织学染色,判断所记录细胞的组织学形态特征。为了记录兴奋性谷氨酸能突触传递与可塑性,本实验所用的人工脑脊液中加入GABAA受体阻断剂picrotoxin和CB1受体阻断剂AM-251,以阻断GABAA和CB1受体介导的抑制性突触传递和长时程抑制。应用KT5720抑制PKA时,需将脑片在KT5720中孵育30 min以上再开始进行记录。应用一氧化氮合酶抑制剂L-NNA时,脑片需灌流L-NNA一个小时后再开始记录。（2）慢性应激大鼠MNCs的长时程可塑性诱导:本部分实验选择出生7-10天的Wistar雄性大鼠,分为慢性束缚应激组和非应激组。慢性束缚应激采用自制的束缚笼进行束缚,每天束缚三小时,连续束缚7天。非应激组不作任何处理。应激开始前和结束后分别测量两组大鼠的体重,计算体重增量。应激结束后剥离胸腺和肾上腺,计算相关胸腺指数和肾上腺指数。电生理记录和长时程可塑性的诱导方式和第一部分相同。电生理结束后,收集内液和固定脑片,鉴定细胞的分泌类型和组织学特征。电生理数据用Clampfit 10.4软件进行分析,所有的实验数据均采用均数±标准误来表示。数据间的统计采用单因素方差分析和秩和检验,P<0.05认为实验组与对照组间具有统计学意义。[结果]第一部分:（1）高频刺激后MNCs的谷氨酸能突触传递出现长时程增强,N1振幅增加40分钟以上,同时伴随双脉冲比值（PPR）下降,表明高频刺激可诱发下丘脑室旁核MNCs谷氨酸能突触传递长时程增强（LTP）。（2）给予mGluR1阻断剂,对高频刺激诱导的MNCs谷氨酸能LTP没有影响,表明高频刺激诱导MNCs谷氨酸能LTP不是通过mGluR1介导的。（3）阻断NMDA受体活性,高频刺激未能诱导出MNCs的谷氨酸能突触LTP,提示MNCs谷氨酸能突触LTP依赖于NMDA受体。（4）MNCs谷氨酸能LTP可被一氧化氮合酶抑制剂阻断,而一氧化氮供体可以模拟电刺激诱导的MNCs谷氨酸能突触LTP,提示MNCs谷氨酸能突触LTP依赖于一氧化氮的生成。（5）阻断PKA信号通路,高频刺激未能诱导MNCs谷氨酸能突触LTP,提示PKA信号通路介导了高频刺激诱导MNCs谷氨酸能突触LTP。第二部分:（1）慢性束缚应激大鼠的体重增量显着低于非应激组。与非应激组相比,应激组大鼠的胸腺指数降低,肾上腺指数升高。同时,慢性束缚应激处理后,CRF mRNA表达神经元的自发性放电活动显着升高。（2）高频刺激可诱发慢性应激大鼠MNCs的谷氨酸能突触传递产生长时程抑制（LTD）,表现为N1的振幅降低,同时伴随PPR升高,表明高频刺激诱导慢性应激大鼠下丘脑室旁核MNCs谷氨酸能突触传递产生LTD。（3）给予CRF非选择性受体阻断剂,高频刺激未能诱导出应激大鼠下丘脑室旁核MNCs谷氨酸能突触LTD,提示CRF受体参与高频刺激对应激大鼠MNCs谷氨酸能突触传递LTD的诱导。（4）给予选择性CRFR1阻断剂,增强高频刺激诱导应激大鼠下丘脑室旁核MNCs谷氨酸能突触传递LTD,而阻断CRFR2导致高频刺激诱导应激大鼠下丘脑室旁核MNCs谷氨酸能突触传递LTP,提示CRFR1可能介导MNCs谷氨酸能突触传递LTP,而 CRFR2 介导 LTD。（5）阻断PKA信号通路,高频刺激未能诱导应激大鼠下丘脑室旁核MNCs谷氨酸能LTD,而阻断PKC信号通路后高频刺激仍能诱导MNCs谷氨酸能突触传递LTD,提示高频刺激诱导应激大鼠MNCs谷氨酸能LTD是通过PKA信号通路而不是PKC信号通路介导的。[结论]（1）高频强直电刺激诱导大鼠下丘脑室旁核MNCs产生依赖于NMDA受体、NO级联反应和PKA信号通路的兴奋性谷氨酸能突触LTP。（2）慢性应激通过CRF受体,损伤大鼠下丘脑室旁核MNCs谷氨酸能LTP,导致高频强直刺激诱发大鼠下丘脑室旁核MNCs产生PKA信号通路介导的谷氨酸能突触LTD。
吕威[2]（2020）在《脑损伤后慢性意识障碍患者神经内分泌紊乱及其对认知、行为与预后的影响》文中进行了进一步梳理目的1.通过检测脑损伤后慢性意识障碍（chronic disorders of consciousness,cDOC）患者的激素水平,统计cDOC患者神经内分泌紊乱发生率及异常激素类型的比例,并进一步探讨cDOC患者神经内分泌紊乱的影响因素,为cDOC患者临床管理提供证据支持;2.通过将脑机接口（brain computer interface,BCI）检测结果与cDOC患者的神经内分泌激素水平进行相关分析,探讨神经内分泌与cDOC患者认知之间的关系;3.通过将cDOC患者的激素水平与临床行为学CRS-R评分作相关分析,探讨神经内分泌与cDOC患者行为学之间的关系;4.通过将cDOC患者的激素水平与病程6个月和12个月时的格拉斯哥预后结局量表（Glasgow outcome scale,GOS）评分作相关分析,探讨神经内分泌是否影响cDOC患者的预后。方法对符合纳入标准的53例cDOC患者进行入院时临床资料的收集、行为学评分及神经内分泌的评估,其中20例cDOC患者进行BCI检测评估认知功能,在发病6个月及12个月后对53例cDOC患者随访并行GOS评分。第一部分根据激素异常的诊断标准统计cDOC患者神经内分泌紊乱发生率及异常激素类型的比例,按照激素结果分为激素异常组和激素正常组,首先对两组间的临床资料进行单因素分析,然后纳入建立logistic回归分析确定影响激素异常的危险因素。第二部分根据BCI检测结果分为认知良好组与认知不良组,比较两组间的激素水平,并将20例cDOC患者的各激素水平与BCI在线准确率作Spearman相关性分析;采用Spearman相关性分析比较各激素水平与cDOC患者行为学量表CRS-R评分之间的关系;根据病程6月和12月时GOS评分将cDOC患者分别分为预后较好组与预后不良组,比较两组患者的激素水平,并与病程6月及12月GOS评分作Spearman相关性分析。结果第一部分:53例cDOC患者中32例发生激素异常,发生率为60.38%,其中单项激素发生改变15例,占比28.30%,两项及以上激素改变17例,占比32.08%。cDOC患者神经内分泌异常的激素类型发生比例依次为:PRL（28.3%）>FT4（18.87%）>皮质醇（13.21%）>睾酮（9.43%）>LH（7.55%）>FSH（5.66%）=雌二醇（5.66%）>ACTH（3.77%）=GH（3.77%）。通过比较激素异常组与激素正常组,单因素分析显示,入院时CRS-R评分（户=0.008）、GCS评分（P=0.035）、ICU监护时间（P=0.023）、性别（P=0.048）、去骨瓣减压（尸=0.049）与激素异常相关。多因素Logistic回归分析显示:CRS-R评分（OR=1.781,P<0.05）、去骨瓣减压（OR=0.129,P<0.05）、昏迷持续时间（出现自主睁眼时间）（OR=1.043,P<0.05）是影响激素异常的独立危险因素。第二部分:认知良好组的GH水平明显高于认知不良组（t=2.580,P=0.048）,GH与BCI在线准确率呈正相关关系（r=0.703,P=0.001）,P300、GH在cDOC患者认知价值判断的AUC分别为0.810、0.952。皮质醇与CRS-R总分（r=0.407,P=0.003）、视觉评分（r=0.335,P=0.014）、听觉评分（r=0.305,P=0.026）、唤醒评分（r=0.449,P=0.001）正相关,FT3（r=0.395,P=0.003）、FT4（r=0.414,P=0.002）与唤醒评分正相关,FT4（r=-0.374,P=0.006）、雌二醇（r=0.438,P=0.002）、PRL（r=0.281,P=0.041）与言语评分相关。伤后6月时预后较好组GH水平低于预后不良组（t=2.470,p=0.017）,FT3水平高于预后不良组（r=-2.227,P=0.031）,logistic回归分析GH是影响6月预后独立因素（OR=0.145,P=0.025）。伤后12月时预后较好组GH水平低于预后不良组（t=2.145,P=.040）,FT3高于预后不良组（t=-2.634,P=0.013）,logistic回归分析FT3是影响12月预后独立因素（OR=2.987,P=0.042）。相关分析显示:FT3（r=0.321,P<0.05）、FT4（r=0.306,P=0.05）与病程6月GOS评分正相关,GH（r=-0.405,P<0.05）与病程6月GOS评分负相关。FT3（r=0.436,P<0.05）与病程12月GOS评分正相关,GH（r=-0.372,P<0.05）与病程12月GOS评分负相关。结论1.神经内分泌紊乱是脑损伤后慢性意识障碍患者常见的并发症,临床管理上应重视。2.昏迷持续时间、首次CRS-R评分及去骨瓣减压是慢性意识障碍患者并发神经内分泌紊乱的高危临床因素。3.慢性意识障碍患者GH与认知及病程6月预后GOS评分相关,FT3与病程12月预后GOS评分相关,GH、FT3是影响预后的重要因素。4.慢性意识障碍患者皮质醇与CRS-R总分、视觉、听觉、唤醒评分相关,FT3、FT4与唤醒评分相关,FT4、雌二醇、PRL与言语评分相关。
宋敏[3]（2019）在《基于嗜神经病毒标记技术的大鼠肺俞穴与下呼吸道双向神经通路共同脑核团研究》文中进行了进一步梳理目的:在针刺治疗哮喘临床有效基础上,基于嗜神经病毒标记技术,筛选大鼠肺俞穴与下呼吸道双向神经通路共同脑核团。方法:实验动物分组:SD大鼠共分5组,分别是正常组、肺俞顺标组、肺俞逆标组、下呼吸道顺标组、下呼吸道逆标组。正常组不做任何标记;下呼吸道顺标组和肺俞顺标组分别用HSV-EGFP标记传入神经通路;下呼吸道逆标组和肺俞逆标组分别用PRV531-CAG-GFP标记传出神经通路。肺俞穴传入神经通路嗜神经病毒HSV-EGFP顺行标记方法:确定第七颈椎棘突,沿后正中线向下找到第三胸椎下两肋间,旁开0.5cm肌肉处（肺俞穴）,缓慢注射嗜神经病毒HSV-EGFP原液2μl（病毒量4×107PFU）到肺俞穴,静置2min,缓慢拔出微量注射器。肺俞穴传出神经通路嗜神经病毒PRV531-CAG-GFP逆行标记方法:方法同肺俞穴传入神经通路标记方法,注射逆行病毒PRV531-CAG-GFP原液2μl（病毒量4×107PFU）。下呼吸道传入神经通路嗜神经病毒HSV-EGFP顺行标记方法:微量注射器针头约伸入气管的中、下1/3交点处,喷注HSV-EGFP稀释液6μl（病毒量2.4×107PFU）到大鼠下呼吸道,立即将微量注射器抽离大鼠气道。下呼吸道传出神经通路嗜神经病毒PRV531-CAG-GFP逆行标记方法:方法同下呼吸道传入神经通路标记方法,喷注逆行病毒PRV531-CAG-GFP稀释液6μl（病毒量2.4×107PFU）。嗜神经病毒标记成功判断标准:HSV-EGFP标记组发病状态为眼神呆滞、鼻流血涕、步态蹒跚、活动迟缓等症状;PRV531-CAG-GFP标记组发病状态为鼻流血涕、四肢出血、精神亢奋、狂躁不安等症状。嗜神经病毒标记脑核团定位分析:灌注取材的时间节点根据大鼠发病状态决定。4%多聚甲醛固定液心脏灌注,脑组织冠状位冰冻切片,漂片法贴片,DAPI染色标记细胞核。采用全自动数字玻片扫描仪扫描组织玻片,结合大鼠脑立体定位图谱定位核团。结果:1、嗜神经病毒标记肺俞穴在大鼠器官组织中荧光信号分布情况:（1）大鼠肺俞穴注射HSV-EGFP转染至发病状态,与正常组器官组织切片比较,病毒标记处肺俞穴无荧光信号分布,内脏组织心、肝、脾、肾、气管、食管、肠、胃、肺均无荧光信号分布。（2）大鼠肺俞穴注射PRV531-CAG-GFP转染至发病状态,与正常组器官组织切片比较,病毒标记处肺俞穴无荧光信号分布,内脏组织心、肝、脾、肾、气管、食管、肠、胃、肺均无荧光信号分布。2、嗜神经病毒标记下呼吸道在大鼠器官组织中荧光信号分布情况:（1）大鼠下呼吸道内喷注HSV-EGFP转染至发病状态,与正常组器官组织切片比较,病毒标记处气管和肺无荧光信号分布,内脏组织心、肝、脾、肾、食管、胃、肠、肺俞穴均无荧光信号分布。（2）大鼠下呼吸道内喷注PRV531-CAG-GFP转染至发病状态,与正常组器官组织切片比较,病毒标记处气管和肺无荧光信号分布,内脏组织心、肝、脾、肾、食管、胃、肠、肺俞穴均无荧光信号分布。3、嗜神经病毒标记外周（下呼吸道或肺俞穴）在大鼠脑组织中荧光信号分布情况:大脑皮层、端脑、中脑、脑桥中均观察到荧光信号分布,荧光信号分布密度由低到高可分为:少量分布、分散分布和集中分布。4、嗜神经病毒标记下呼吸道和肺俞穴在脑组织中核团分布结果:（1）肺俞穴传入神经通路脑核团嗜神经病毒HSV-EGFP标记结果:中脑部分布于下丘脑、中脑导水管周围灰质、被盖背侧交叉、埃-韦二氏核、间质核、丘脑;脑桥部分布于动眼神经核、红核、脑桥网状核、后椎核、网状核、面神经核、外侧巨细胞旁核、内侧纵束、迷走神经运动背核、下橄榄核、孤束核、三叉神经脊髓束。（2）肺俞穴传出神经通路脑核团嗜神经病毒PRV531-CAG-GFP标记结果:端脑部分布于运动皮层、下丘脑、斜角带核、隔核、苍白球、丘脑核、杏仁核;中脑部分布于内囊、A13多巴胺细胞、内脏核、黑质纹状体束、背内侧核、视神经束、中脑导水管周围灰质、网状核、内侧乳头核、岩石核、缰核、红核、动眼神经核、三叉神经中脑束、中缝背核、顶盖脊髓束、被盖核、中缝核、内侧丘系;脑桥部分布于A5去甲肾上腺素细胞、上橄榄核、蓝斑、前庭上核、展神经核、楔束核、薄束核、孤束核、迷走神经运动背核、三叉神经核、腹侧呼吸组、下橄榄核。（3）下呼吸道传入神经通路脑核团嗜神经病毒HSV-EGFP标记结果:端脑部分布于皮层、丘脑、胼胝体、尾状核、苍白球、下丘脑、网状核、内囊、杏仁核、视神经束、中脑导水管周围灰质、动眼神经核;中脑部分布于缰核、埃-韦二氏核、红核;脑桥部分布于蓝斑、中缝大核、被盖核、三叉神经核、孤束核、迷走神经运动背核、下橄榄核。（4）下呼吸道传出神经通路脑核团嗜神经病毒PRV531-CAG-GFP标记结果:下丘脑、蓝斑、内侧纵束、腹侧呼吸组吻端、下橄榄核、孤束核、迷走神经运动背核。5、嗜神经病毒标记肺俞穴与下呼吸道神经通路共同核团:（1）肺俞穴传入神经通路与下呼吸道传出神经通路共同核团:下丘脑背区、内侧纵束、迷走神经运动背核、孤束核腹侧部、孤束核中间部、孤束核内侧部。（2）下呼吸道传入神经通路与肺俞穴传出神经通路共同核团:下丘脑室旁核内侧副细胞部、苍白球、内囊、动眼神经副交感核、内侧动眼神经副核、红核副细胞部、红核巨细胞部、中脑导水管周围灰质、埃-韦二氏核、背内侧下丘脑背核、下丘脑外侧穹窿周围部、A5去甲肾上腺素细胞、蓝斑、中缝大核、三叉神经脊束核极间部、内侧纵束、孤束核、迷走神经运动背核。（3）下呼吸道传入神经通路与肺俞穴传入神经通路共同核团:中脑导水管周围灰质、埃-韦二氏核、丘脑腹后内侧核、动眼神经副交感核、内侧动眼神经副核、红核副细胞部、外侧网状核、内侧纵束、迷走神经运动背核、三叉神经脊束核极间部、小细胞网状核、孤束核背外侧区、孤束核、下橄榄核内侧核。（4）下呼吸道传出神经通路与肺俞穴传出神经通路共同核团:下丘脑背区、下丘脑外侧穹窿周围部、内侧纵束、迷走神经运动背核、孤束核腹侧部、孤束核中间部、孤束核内侧部。6、肺俞穴和下呼吸道神经通路共同核团:孤束核、迷走神经运动背核、内侧纵束均参与4条神经通路（肺俞穴传入神经通路、肺俞穴传出神经通路、下呼吸道传入神经通路和下呼吸道传出神经通路）,是肺俞穴与下呼吸道神经通路重要的共同脑核团。结论:（1）肺俞穴传入神经通路与下呼吸道传出神经通路共同脑核团包括下丘脑背区、内侧纵束、迷走神经运动背核、孤束核。（2）下呼吸道与肺俞穴的内脏-体表反应存在脑核团神经基础,在下丘脑室旁核内侧副细胞部、苍白球、内囊、下丘脑外侧穹窿周围部、背内侧下丘脑背核、A5去甲肾上腺素细胞、蓝斑、中缝大核、动眼神经副交感核、内侧动眼神经副核、中脑导水管周围灰质、红核副细胞部、红核巨细胞部、埃-韦二氏核、迷走神经运动背核、孤束核、内侧纵束和三叉神经脊束核极间部存在交汇整合。（3）肺俞穴与下呼吸道双向神经通路共同脑核团为孤束核、迷走神经运动背核和内侧纵束。
辛培源,王博强,田帅,田硕,梁宸,董正,张婷,金晓航,史娟[4]（2017）在《精氨酸加压素在中枢神经系统中的作用及机制》文中认为精氨酸加压素（arginine vasopressin,AVP）是世界上发现最早的神经内分泌激素之一,也常简称加压素。以往的研究表明加压素在下丘脑合成后通过垂体后叶释放入血,循外周血发挥广泛的生理调节作用,如参与水盐代谢,心血管功能的调节。但除此以外,近年来的研究表明,该神经内分泌激素及其受体也在中枢神经系统内也有广泛的分布,并且发挥重要的生物学作用。本文就近年来该激素在疼痛和社会行为等方面的研究进展进行综述。
陈宜威[5]（2012）在《高温环境下运动大鼠体液调节激素的变化及相关因素的研究》文中研究指明研究目的:本选题通过动物实验对高温、运动联合以及热适应后的力竭性运动进行研究。通过本研究,了解高温环境下运动大鼠体液调节激素及相关因素的变化,为运动员在高温环境下的训练和比赛提供一定的基础理论依据和参考。研究方法:选取8周龄雄性Wistar大鼠48只,随机分为6组:安静对照组（23℃暴露6天+23℃暴露组）（Q）,38℃暴露6天+38℃暴露组（HP）,23℃运动6天+23℃运动力竭组（R）,38℃运动6天+38℃运动力竭组（HA）,23℃运动6天+38℃运动力竭组（HE）,38℃暴露6天+38℃运动力竭组（P）,运动方式为递增负荷运动,速度为12-22m/min,坡度为0-5%,暴露或者运动环境温度设定为38℃,相对湿度为50±5%。运动及暴露后即刻腹主动脉取血分离出血清和血浆,取下丘脑组织液氮急冻后置于-80℃低温冰箱。测定血清Na+、K+、AVP、ALD、ANP的浓度,测定血浆Posm的浓度,测定下丘脑AVPmRNA基因表达。研究结果:（1）38℃运动6天+38℃运动力竭组（HA）与安静对照组（23℃暴露6天+23℃暴露组）（Q）组比较,AVP、ALD升高明显,K+下降不明显,血浆Posm、AVPmRNA、Na+升高非常明显,ANP、Na+/K+升高不明显。（2）与23℃运动6天+23℃运动力竭组（R）比较,38℃运动6天+38℃运动力竭组（HA）AVP、ALD、ANP、Posm、Na+、Na+/K+均升高,K+降低,但均无显着性差异,AVPmRNA上调较为明显。（3）38℃暴露6天+38℃运动力竭组（P）与38℃暴露6天+38℃暴露组（HP）组比较,AVP、ALD、ANP、Posm、Na+、K+升高不明显。Na+/K+降低明显,AVPmRNA上调非常明显。研究结论:（1）常温和高温环境下运动,体液调节激素及相关因素的变化对于维持高温环境下运动机体的体液平衡起到了重要作用。（2）常温运动、高温运动和高温暴露处理后,大鼠在常温和高温环境下机体的体液调节能力均增强,高温运动处理大鼠的体液调节能力更好。（3）常温运动、高温运动和高温暴露处理后,大鼠下丘脑AVPmRNA上调,增加了机体的热适应能力。
赵东芹[6]（2011）在《大鼠下丘脑前部—延髓内脏中枢参与束缚—浸水应激反应的神经元类型及突触可塑性》文中研究指明束缚-浸水应激（restraint water-immersion stress,RWIS）是一种强度较大的复合刺激,能在数小时内产生迷走神经介导的胃运动机能亢进、胃酸分泌增多、急性胃粘膜损伤等现象,该应激模型被广泛用来研究应激性胃溃疡的发生机制及其临床治疗药物的筛选。Fos蛋白是即刻早期基因（IEG）c-fos的表达产物,神经元有Fos表达,表明神经元处于活动状态。我们课题组前期的研究发现束缚-浸水应激不同时间段（30、60、120 min）,迷走复合体（DVC）、疑核（NA）以及下丘脑前部的视上核（SON）、室旁核（PVN）、视交叉上核（SCh）等均有不同程度的Fos表达,说明上述核团参与束缚-浸水应激致胃粘膜损伤的中枢调控。束缚-浸水应激诱导的胃损伤效应能被预先切断膈肌下迷走神经或给予阿托品所抑制,而预先切除垂体、肾上腺或给予肾上腺素能α-受体阻断剂酚苄明对束缚-浸水应激引起的胃运动机能亢进、胃酸分泌增多没有影响。这说明胃机能的神经调控主要是副交感控制,而且这种副交感信息主要来自迷走神经背核（DMV）,部分来自疑核。迷走神经背核、疑核过度活动可能是导致大鼠胃粘膜损伤的初级中枢机制之一,但电刺激、化学刺激迷走神经背核、疑核均引起胃运动抑制。是不是束缚-浸水应激过程中,高位中枢——下丘脑前部的活动解除了延髓内脏中枢对胃的抑制作用,从而导致胃运动亢进、胃酸分泌增多的呢?如果是,那么:1.束缚-浸水应激过程中,延髓迷走复合体、疑核等核团（称为延髓内脏中枢）内被激活的神经元是什么性质的神经元?2.视上核、室旁核是下丘脑前部最显着的2个核团,主要由大细胞精氨酸加压素能神经元和催产素能神经元组成,参与多种应激反应。那么,在束缚-浸水应激过程中,下丘脑前部视上核、室旁核中被激活的神经元是不是催产素能神经元和精氨酸加压素能神经元?3.如果下丘脑前部室旁核和视上核催产素能神经元和精氨酸加压素神经元的轴突末梢除了分布到垂体后叶之外,还下行到延髓内脏中枢,与这里的神经元形成突触联系,以神经递质的形式调控这些神经元的活动。那么束缚-浸水应激后迷走复合体、疑核的神经元胞体膜或树突膜上的精氨酸加压素受体、催产素受体（胞体膜上分布有精氨酸加压素受体、催产素受体的神经元我们称为精氨酸加压素敏感、催产素敏感神经元）会发生什么变化?4.神经系统是生命活动中起整合和调节作用的信息系统,神经元是神经系统的结构和功能单位,具有接受、整合和传递信息的功能。突触是神经元之间信息交流最关键的连接部位,在反射活动中各种神经冲动都要通过突触进行传导,可以说突触是整个神经系统传递的最小功能单位,突触的数量及结构的完整性对维持脑功能的正常发挥起重要作用。突触膨体素（SYN）是一种广泛分布于突触前囊泡膜上的钙结合酸性糖蛋白,参与突触囊泡的导入、转运和神经递质的释放、突触囊泡再循环、突触发生和稳定等生理过程,其含量与突触密度呈正相关。突触蛋白I主要分布在神经末梢的小型突触前囊泡外侧,磷酸化后可作用于囊泡释放池释放囊泡、囊泡与突触前膜的融合以及囊泡的再循环等几个环节,在神经递质释放及突触可塑性等生理活动过程中具有重要作用。因此,突触膨体素和突触蛋白I可作为突触前终末的特异性标记物,用来检测突触的密度和分布,从而反映突触可塑性的变化情况。那么,在束缚-浸水应激过程中,下丘脑前部、延髓内脏中枢部位的突触膨体素和突触蛋白I的表达会发生什么样的变化?为解决上述问题,设计实验如下:（1）根据束缚-浸水时间将雄性Wistar大鼠随机分为2组,分别是对照组（unstressed group）和应激1h组。以Fos作为神经元活动的标志,采用Fos与儿茶酚胺能神经元（CA）标志酶酪氨酸羟化酶（TH）、胆碱能神经元（ACh）标志酶胆碱乙酰转移酶（ChAT）以及催产素（OT）、精氨酸加压素（AVP）等神经递质和催产素受体（OTR）、精氨酸加压素Ⅰ型b亚型受体（V1bR）免疫组织化学双标技术,研究大鼠下丘脑前部、延髓内脏中枢等核团内相应神经元的活动情况,探讨这些核团中哪类神经元参与应激状态的胃机能调控,哪类神经元作用大一些,为进一步阐明束缚-浸水应激致胃机能紊乱的中枢调控机制提供实验依据和基础资料。（2）根据束缚-浸水时间将雄性Wistar大鼠随机分为4组,分别是对照组（unstressed group）和应激1h、2h、4h组。采用免疫组织化学技术及Western-blotting技术观察束缚-浸水应激不同时间段下丘脑前部-延髓内脏中枢主要核团中突触膨体素和突触蛋白I的变化,旨在探讨束缚-浸水应激过程中上述部位是否发生突触可塑性的改变,如有,哪些核团发生改变,从而为研究束缚-浸水应激致胃粘膜损伤后突触的重塑打下基础。本文研究发现:1.迷走神经背核、疑核中胆碱能神经元过度活动是束缚-浸水应激致胃粘膜损伤中枢机制之一乙酰胆碱转移酶免疫反应阳性（ChAT-IR）神经元分布于DVC吻-尾全段。RWIS 1h组DMV和NA中单位面积内的ChAT-IR神经元较对照组显着减少;Fos和乙酰胆碱转移酶双标阳性（Fos+ChAT-IR）神经元在DMV吻段、中段、尾段和NA中分别是对照组的3.60、16.00、4.00和3.29倍,占ChAT-IR神经元的比例均显着高于对照组。而在NTS中ChAT-IR神经元、Fos+ChAT-IR神经元在RWIS 1h组和对照组间几无变化,Fos+ChAT-IR神经元占ChAT-IR神经元的比值组间差异不显着。这说明DMV和NA中ACh能神经元的过度活动,尤其是DMV中段ACh能神经元的过度活动是RWIS致胃粘膜损伤的主要机制之一,NTS中的胆碱能神经元不参与RWIS致胃粘膜损伤的中枢调控过程。2.延髓内脏中枢主要核团中的儿茶酚胺能神经元参与束缚-浸水应激致胃粘膜损伤的调控,而下丘脑前部核团中儿茶酚胺能神经元很少甚或没有,因此不是下丘脑前部参与束缚-浸水应激反应的主要神经元,但核团内神经元的活动可能受延髓儿茶酚胺能神经元的反馈调节Fos和酪氨酸羟化酶双标阳性（Fos+TH-IR）神经元主要分布于NTS（A2/C2细胞群）和VLM（A1/C1细胞群）,AP中也有较多分布,DMV中只有中段和尾段有少量酪氨酸羟化酶免疫反应阳性（TH-IR）神经元,NA中只有TH阳性终末,未见TH-IR神经元胞体存在。RWIS 1h组Fos+TH-IR神经元占TH-IR神经元的比例在DMV、NTS、AP和VLM分别为38.0%、34.4%、18.6%和45.7%,分别是对照组（分别为14.3%、9.7%、4.5%、18.9%）的2.7倍、3.6倍、4.1倍和2.4倍,组间差异均极显着（P<0.01）,说明延髓内脏中枢上述核团中的CA能神经元参与了RWIS致胃机能紊乱的中枢调控。PVN中只有少量TH-IR神经元胞体分布于,SON中没有TH阳性胞体,但两核团中都有大量TH阳性终末,提示在RWIS过程中PNV、SON中的CA能神经元并不起主要作用或不起作用,但核团中神经元的活动可能受延髓CA能神经元的反馈调控。3.下丘脑前部主要核团中的催产素能、精氨酸加压素能神经元参与束缚-浸水应激反应,且精氨酸加压素能神经元活动强于催产素能神经元催产素免疫阳性（OT-IR）神经元主要分布于PVN内侧大细胞部及SON背侧;精氨酸加压素免疫阳性（AVP-IR）神经元主要分布于PVN大细胞部和SON的腹侧。RWIS 1h组,PVN中有约34%的OT-IR神经元、40%的AVP-IR神经元表达Fos;SON中有约28%的OT-IR神经元、53%的AVP-IR神经元表达Fos。束缚-浸水应激激活了PVN、SON中的OT和AVP能神经元,且AVP能神经元活动强于OT能神经元。4.延髓内脏中枢多数活动神经元的胞体膜上分布有催产素受体、精氨酸加压素V1b受体,提示催产素、精氨酸加压素在束缚-浸水过程中通过OT受体、V1b受体调节延髓内脏中枢神经元活动催产素受体免疫阳性（OTR-IR）神经元、V1b受体免疫反应阳性（V1bR-IR）神经元都几近均匀地分布于DVC吻-尾全段。DMV中RWIS 1h组超过10%的OTR-IR和V1bR-IR神经元表达Fos,而对照组只约3%;NTS中RWIS 1h组约10%的OTR-IR神经元和8%V1bR-IR神经元为双标神经元,而对照组则分别为5%和4%,这些RWIS 1h组和对照组的显着差异说明DMV、NTS中的神经元的活动受OT、AVP的调控。RWIS 1h组Fos与OTR双标免疫阳性（Fos+OTR-IR）、Fos与V1bR双标免疫阳性（Fos+V1bR-IR）神经元神占Fos-IR神经元的比值,在DMV中分别约58%和72%,在NTS中约45%和52%,说明OT、AVP对这些核团中神经元活动的调控主要是通过OT受体和V1b受体,尤其是V1b受体。5.短时间的束缚-浸水应激改变了突触膨体素和突触蛋白I在下丘脑前部和延髓内脏中枢中的含量及其分布在RWIS 0h到4h过程中,下丘脑前部中突触膨体素表达在不同应激时间段差异不显着;但突触蛋白I,尤其是突触蛋白Ib的含量发生了显着性变化,这说明短时间的RWIS应激引起下丘脑前部突触可塑性的改变。在RWIS 0h到4h过程中,延髓中的突触膨体素表达量呈现一个先增加后减少的趋势,突触蛋白I含量也发生了显着性变化,说明延髓内脏中枢在RWIS致胃粘膜损伤中枢调控过程中也发生了突触可塑性的变化。综上所述,束缚-浸水应激诱导DMV、NA中胆碱能神经元Fos显着表达,说明DMV、NA中胆碱能神经元的过度活动是RWIS诱导胃粘膜损伤的中枢机制之一。DVC、VLM中的CA能神经元可能投射到下丘脑前部,激活下丘脑前部的OT、AVP能神经元,尤其是AVP能神经元,OT、AVP能神经元继而投射到DMV、NTS,通过与OT受体、V1b受体结合激活这些核团中的OT、AVP敏感神经元,进而参与束缚-浸水应激导致胃粘膜损伤的调控。短时间的束缚-浸水应激不影响突触膨体素在下丘脑前部的含量和分布,但显着影响突触膨体素在延髓内脏中枢中含量及其分布;短时间的束缚-浸水应激影响突触蛋白I在下丘脑前部和延髓内脏中枢中含量及其分布,说明RWIS过程中下丘脑前部、延髓内脏中枢发生了突出可塑性的改变。
兰晓宇[7]（2010）在《不同强度光照对母鸡中脑和间脑c-fos基因表达的影响》文中研究表明c-fos基因是即早基因家族中最重要成员之一,普遍存在于中枢神经细胞中,正常情况下表达水平很低,难以检测,多种刺激因素可诱导该基因迅速的一过性表达,由此可以描绘出一个参与该信息传递过程的中枢通路,并可获得脑部相应功能活动数据。本研究采用c-fos法观察了母鸡脑部对不同强度光照的反应。将150日龄母鸡右眼遮光7天后接受不同强度（10Lux、20Lux、30Lux和40Lux）的光照刺激1.5h,暗适应1.5h后灌流固定,取脑制作石蜡切片,采用免疫组化和原位杂交方法检测c-fos基因在中脑和间脑的表达。同时采用Western blot技术检测Fos蛋白的存在。根据c-fos基因表达出现的方式、部位和数量,分析鸡脑参与光信息传递过程的中枢通路,为进一步闸明鸟类视觉形成机理提供有价值的资料;由Fos蛋白在不同光照强度下对母鸡表达的不同,判断母鸡脑对不同强度光线刺激引起的反应,探究光照对母鸡生产性能的影响机制,为养鸡业科学利用光照提供理论依据。同时应用免疫组化方法检测了促性腺激素释放激素（GnRH）免疫反应阳性神经元在中脑和间脑的分布,通过其与c-fos基因表达产物在神经元内的关系,探讨母鸡脑内光照刺激与生殖活动间内在联系。结果显示:免疫组化方法检测到母鸡的间脑和中脑内有大量Fos样免疫反应阳性神经元,主要见于左侧,分布于视顶盖中央灰质层（SGC）,圆核（ROT）,外侧膝状腹侧核（ Glv）,半月核（SLu）,峡核大细胞部（Imc）,狭核小细胞部（Ipc） ,室旁核（PVN）,弓状核（ARC）,动眼神经核（OMv）。阳性细胞计数与对照组相比较差异显着（p<0.010）;不同强度光照诱导母鸡c-fos基因的表达不同,在SGC ,ROT,SLu,Imc ,Ipc,Glv,20Lux,30Lux组的表达较对照组明显增加,40Lux组次之,10Lux组最低;PVN,ARC为20Lux组表达最强, 30Lux,40Lux组逐渐减弱;而OMv的表达随着强度的增加而加强;原位杂交方法检测到母鸡的间脑和中脑内有大量Fos样阳性神经元,主要见于左侧,分布于视顶盖中央灰质层（SGC）,圆核（ROT）,外侧膝状腹侧核（ Glv）,半月核（SLu）,峡核大细胞部（Imc）,峡核小细胞部（Ipc） ,室旁核（PVN）,弓状核（ARC）。并且蛋白印迹法（western blot）检测的结果显示,49kD到90kD间有明显特异条带,即Fos蛋白条带,证明在母鸡脑蛋白提取液中有Fos蛋白存在。GnRH在中央灰质层（SGC）,圆核（ROT）,室旁核（PVN）,弓状核（ARC）均有表达。表明鸡的离顶盖通路不仅是视觉信息加工的主要通路,而且对光照刺激的反应亦较敏感;离顶盖通路的一个侧支顶盖—峡核回路也参与光信息的传递与加工;母鸡对不同强度光照有不同的反应;光照刺激可能通过影响光信息通路中神经核团的GnRH分泌与含量对母鸡生殖功能起调节作用。
刘志元[8]（2010）在《不同运动应激状态下丘脑—垂体—肾上腺轴应激反应机制研究》文中认为研究目的:运动应激是运动训练与运动健身产生效应的生物学基础,但是运动应激时的下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA）轴中枢反应机制研究较少,尤其对于不同运动应激时一氧化氮（NO）通过糖皮质激素受体（GR）与糖皮质激素（GC）结合而影响HPA轴调节、以及GR、NOS的变化对HPA轴中枢调节系统研究未见报道。本研究以不同负荷跑台运动引起的应激状态为研究对象,从HPA轴外周激素水平变化、中枢相关受体基因水平变化和蛋白表达变化等不同层次和角度,分析不同负荷运动应激的HPA轴的应激程度及中枢调节规律,揭示不同运动负荷应激时的中枢调节机制。研究方法:11周龄雄性SD大鼠130只,随机分为长期运动组、一次运动组及对照组。长期运动组大鼠以高、中、低三种不同负荷进行跑台训练,6天/周,1小时/天,实验期8周;一次运动组亦采用三种不同负荷运动,采用长期训练组同等负荷末次运动方案。测试方法与指标:双抗体夹心酶标免疫分析法测定血清CORT、T、ACTH、下丘脑CRH含量;免疫组化法测海马CA1区、下丘脑弓状核、腹内侧核、背内侧核、室旁核、中央杏仁核进行形态观察,并测定GR、NOS等阳性神经元数量变化;RT-PCR法测定海马、下丘脑、杏仁核GR、MR、NOS基因转录水平,Western blotting法测定上述核团GR、NOS蛋白表达量。研究结果:（1）长期大负荷运动组海马MR、GR转录减少、GR表达减少（P<0.05）,NOS转录及表达水平无明显变化;下丘脑兴奋提高,GR、MR转录水平降低,NOS表达增多（P<0.05）;杏仁核GR基因转录水平无明显变化,杏仁核NOS基因转录增多（P<0.05）;ACTH升高,CRH、CORT浓度降低。（2）长期中等负荷运动组海马GR、NOS基因转录及表达增多（P<0.01）,海马兴奋性降低;下丘脑兴奋性提高,GR转录减少,蛋白浓度升高,NOS基因转录及表达增多（P<0.05）;杏仁核兴奋性提高,GR、NOS基因转录及表达减少,各核团MR基因转录减少;CRH、ACTH、CORT浓度升高（P<0.05）。（3）长期低负荷运动组海马兴奋性无明显变化,MR基因转录增多,GR转录水平降低,NOS基因转录及表达增多（P<0.05）;下丘脑兴奋,NOS、GR基因转录及表达增多（P<0.05）;杏仁核NOS基因转录及表达减少,GR基因转录及表达无明显变化,杏仁核及下丘脑MR基因转录减少,CRH、CORT浓度升高,ACTH无明显变化。（4）一次大负荷运动组海马NOS基因转录及表达增多,GR基因转录增多, MR基因转录减少,海马兴奋性降低;下丘脑兴奋性降低,NOS基因转录及表达增多,GR、MR基因转录减少,GR蛋白升高（P<0.05）;杏仁核兴奋性降低,NOS、GR基因转录及表达减少,MR基因转录增多（P<0.05）;CRH、CORT浓度升高,ACTH浓度降低（P<0.05）。（5）一次中等负荷运动组海马NOS基因转录及表达增多,GR基因转录及表达水平降低,海马兴奋性无明显变化;下丘脑室旁核兴奋,NOS基因转录及表达增多,GR基因转录水平无变化,表达增多（P<0.05）;杏仁核GR基因转录及表达增多,NOS基因转录减少,但NOS浓度升高,各核团MR转录降低（P<0.05）;CRH、CORT浓度升高,ACTH浓度降低。（6）一次低负荷运动海马兴奋性无变化,NOS、GR基因转录及表达减少,MR基因转录无变化;下丘脑兴奋性提高NOS基因转录无明显变化,NOS表达增多,GR基因转录及表达增多;杏仁核兴奋性提高,NOS基因转录及表达增多,GR基因转录无明显变化,表达增多,杏仁核及下丘脑MR基因转录减少（P<0.05）;CRH、CORT浓度升高,ACTH浓度降低（P<0.05）。研究结论:（1）长期大负荷运动应激后海马、下丘脑及杏仁核兴奋性降低,HPA轴抑制;一次大负荷运动应激造成下丘脑及杏仁核兴奋性升高,HPA轴激活。（2）长期大负荷运动后海马抑制是由于海马兴奋性损伤导致;一次大负荷运动后海马抑制是由于外周高水平GC的负反馈调节。（3）运动应激反应中海马的兴奋性与NOS无相关性,即NOS仅参与海马兴奋性损伤,而不参与其兴奋性调节。（4）长期中等负荷运动与一次中等负荷运动应激HPA轴主要不同在于ACTH变化,长期中等负荷ACTH升高由于杏仁核NOS参与对垂体的调节,一次中等负荷后ACTH下降主要受外周GC、下丘脑与杏仁核的GR负反馈调节所致。（5）小负荷运动后海马兴奋性无明显变化,杏仁核与下丘脑兴奋性提高,长期小负荷运动后杏仁核NOS参与垂体ACTH调节,而一次负荷ACTH下降则受GC与海马GR的反馈调节。（6）长期运动HPA轴的应激反应中枢调节多于外周调节;一次运动主要以HPA轴各环节的反馈调节为主。
程金金[9]（2009）在《光诱导c-fos基因在不同日龄母鸡中脑和间脑的表达》文中研究说明c-fos基因是即早基因家族中最重要成员之一,普遍存在于中枢神经细胞中,正常情况下表达水平很低,难以检测,多种刺激因素可诱导该基因迅速的一过性表达,由此可以描绘出一个参与该信息传递过程的中枢通路,并可获得脑部相应功能活动数据。本研究用c-fos法研究了不同日龄母鸡脑部对光照刺激的反应,对14、60、120 180和300日龄母鸡右眼遮光7 d后接受20 lx的光照刺激1.5 h,暗适应1.5 h后灌流固定,取脑制作石蜡切片,采用免疫组化方法检测c-fos基因在中脑和间脑的表达。同时采用Western blot技术检测Fos蛋白的存在。根据c-fos基因表达出现的方式、部位和数量,分析鸡脑参与光信息传递过程的中枢通路,为进一步闸明鸟类视觉形成机理提供有价值的资料;由Fos蛋白在不同日龄母鸡表达的不同,判断不同日龄母鸡脑对光线刺激引起的反应,探究光照对母鸡生产性能的影响机制,为养鸡业科学利用光照提供理论依据。同时应用免疫组化方法检测了促性腺激素释放激素（GnRH）免疫反应阳性神经元在中脑和间脑的分布,通过其与c-fos基因表达产物在神经元内的关系,探讨母鸡脑内光照刺激与生殖活动间内在联系。结果显示,不同日龄母鸡c-fos基因在视顶盖中央灰质层（SGC）,圆核（ROT）,外侧膝状腹侧核（Glv）,峡核大细胞部（Imc）,狭核小细胞部（Ipc）,室旁核（PVN）,弓状核（ARC）均有表达,阳性细胞主要出现在脑左侧,阳性细胞计数与对照组相比较差异显着（p<0.010）;不同日龄母鸡c-fos基因在SGC ,ROT ,Glv ,Imc ,Ipc的表达不同,14,60日龄表达较对照组明显增加,120,180日龄保持较高水平,300日龄明显下降;不同日龄母鸡c-fos基因在PVN,ARC的表达不同,120,180日龄c-fos基因表达强度最大,14,60日龄次之,300日龄最低;GnRH在中央灰质层（SGC）,圆核（ROT）,室旁核（PVN）,弓状核（ARC）均有表达。表明鸡的离顶盖通路不仅是视觉信息加工的主要通路,而且对光照刺激的反应亦较敏感;离顶盖通路的一个侧支顶盖—峡核回路也参与光信息的传递与加工;不同日龄母鸡对光照有不同的反应;光照刺激可能通过影响光信息通路中神经核团的GnRH分泌与含量对母鸡生殖功能起调节作用。
王少军[10]（2007）在《针刺对下丘脑促性腺激素释放激素神经元的调节规律及机制》文中指出1目的探讨针刺治疗生殖内分泌疾病的特异规律性的穴位及其在动情周期不同阶段对生殖内分泌功能的调节规律。为进一步提高针灸疗效、完善疗效机制提供科学实验依据，并指导临床规范化选穴。2方法实验采用雌性有正常动情周期的Sprague-Dawley处女大鼠260只，体重240±40g，在氨基甲酸乙酯（10％，1.0-1.2g／kg）麻醉状态下进行。动情周期是根据阴道脱落细胞的HE染色判断。实验过程分4部分进行。实验数据均以平均值±标准误（Mean±SE）表示。2．1电生理部分实验动物32只，其中动情间期／动情后期：18只，动情前期／动情期：14只。（1）鉴定下丘脑特异分泌促性腺激素释放激素（GnRH）神经元的方法用充灌10％辣根过氧化酶的1M氯化钾的玻璃微电极（尖端约0.5-1μm，阻抗约10-15MΩ）细胞外记录下丘脑内侧视前区、弓状核、室旁核神经元放电活动。当记录到神经元放电30s后，给以“触摸阴蒂”刺激（性唤起刺激），观察记录到的神经元对这种模拟性刺激的反应。如果神经元放电在模拟性刺激后增强或减弱，再经颈外静脉分别注射雌二醇（30-50ng／kg）、睾酮（8mg／kg）、氢化可的松（20mg／kg），观察不同激素能否产生反馈性调节作用，进一步鉴定神经元的属性。如果注射雌二醇、睾酮后神经元放电减弱，注射氢化可的松神经元放电无明显改变，初步认为该神经元就是下丘脑与性唤起刺激相关神经元。再用正电泳电流电泳辣根过氧化酶（HRP）标记该神经元（50V，10Hz／次脉冲方波，30min），3h后用4％多聚甲醛和1.25％戊二酸灌流，脱水，冰冻切片制作，进行TMB染色和GnRH免疫组化染色分析，探讨记录的神经元是否是下丘脑GnRH神经元。（2）遴选针刺调节生殖内分泌功能的有效穴位充灌2％旁胺天蓝（Pontamine sky btue）的0.1M醋酸钠的玻璃微电极（尖端约0.5-1μm，阻抗约10-15MΩ）寻找下丘脑与性唤起刺激神经元，并以该神经元放电为指标，比较针刺身体不同部位的8个穴位：内关、膻中、厥阴俞、中脘、肾俞、关元、子宫、足三里30s对这类神经元的激活效应，并比较最有效的部位、穴位。单细胞记录采用玻璃微电极及铂金电极，在隔离屏蔽内进行。神经元电活动经微电极输入DAM50（美国WPI公司）微电极放大器后引入CED系列MICR01401Ⅱ（500KHz 16-bit ADC）信号采集装置，将模拟信号转换为数字信号传输给计算机，经Spike2计算机信号分析系统（England CED公司，CB40FE）对数字信号进行分析。2．2卵巢-体表相关性与穴位关系的研究实验动物13只，随机分两个组：芥子油注射组（8只）和0.9％生理盐水注射组（5只）。芥子油注射组在大鼠左侧卵巢内注射0.08ml（10％）芥子油，制造一个“卵巢炎症”模型，并在尾静脉注射伊文氏兰0.25ml（浓度50mg／ml，按每100g体重5mg），通过C类纤维的轴突反射，诱发出伊文氏兰的渗出。研究血浆渗出点在皮肤的分布区域（敏感穴区）与支配卵巢功能的脊髓神经节段及特异激活下丘脑与性唤起刺激相关神经元的穴位之间的关系。并与卵巢注射0.9％生理盐水0.08ml的雌鼠对比。2．3针刺对GnRH在脑中枢免疫反应表达的影响实验动物72只，随机分为三个组：对照组（24只）、关元组（24只）、内关组（24只），每组中都有动情间期、动情前期、动情期、动情后期的大鼠（根据阴道涂片确定）。电针治疗在早晨9：30开始持续30min（疏密波，频率20-60Hz，强度2-3mA），下午15时断头取脑组织。通过免疫组化染色观察GnRH在脑中枢的分布及针刺前、后GnRH在脑中枢特定部位的表达有何变化。2．4针刺对外周血GnRH、LH、E2水平的调节（1）实验动物104只，随机分为三个组：对照组（32只）、关元组（36只）、内关组（36只），每组中都有动情间期、动情前期、动情期、动情后期的大鼠（根据阴道涂片确定）。电针治疗在早晨9：30开始持续30min（疏密波，频率20-60Hz，强度2-3mA）。分别在针刺治疗前、电针30 min、出针30 min（Omin、30min、60min）从髂外静脉采集静脉血进行GnRH和黄体生成素（LH）放射免疫检测。比较外周血GnRH、LH水平的变化。（2）实验动物24只，随机分为2个组：损毁组（损毁正中隆起）（12只）和假损毁组（12只），比较电针关元（CV4）穴对损毁组和假损毁组外周血中GnRH、LH和雌二醇（E2）的调节规律。3结果（1）在下丘脑内侧视前区、弓状核、室旁核附近记录到了与“性唤起”刺激相关神经元，内侧视前区最多，其次为弓状核、室旁核。经HRP示踪标记及GnRH免疫组化染色结果显示：HRP示踪标记的与“性唤起”刺激相关神经元，几乎是与GnRH免疫反应阳性表达的部位重叠的。（2）针刺后下丘脑与“性唤起”刺激相关神经元放电增加的百分率按穴位所在部位的脊髓神经节段由上到下的顺序：内关（PC6）、膻中（CV17）、厥阴俞（BL14）、中脘（RN12）、肾俞（BL23）、关元（CV4）、子宫（Ex-CA1）、足三里（ST36），在动情前期／动情期雌鼠依次为122.59％、124.68％、205.67％、204.68％、246.58、341.76％、444.15％、291.57％；在动情间期／动情后期雌鼠依次为77.85％、107.8l％、117.37％、202.39％、212.39％、473.24％、450％、299.68％。从针刺部位来看下丘脑与“性唤起”刺激相关兴奋性神经元电活动增加的百分率由大到小的顺序为：下腹部（脐以下）＞下肢、下背部（L1-S5）＞上腹部（剑突-脐）、背部（T12以上）＞胸部（剑突以上）、上肢。针刺关元（CV4）、子宫（Ex-CA1）、足三里（ST36）下丘脑GnRH神经元放电增加的百分率较其他穴位高。（3）伊文氏兰检测出的敏感穴区分布在支配卵巢功能的脊髓神经节段，所对应的穴位正是特异激活下丘脑与性唤起刺激相关神经元的穴位。①渗出点在体表的分布：芥子油注射组明显多于盐水注射组。从芥子油注射组大鼠渗出点的分布情况看：T13-L2皮肤血浆渗出点分布最多，腹部较背部分布集中。皮肤血浆渗出点在不同脊髓神经节段分布由多到少的顺序为：T13-L2＞L6-S2＞T10-T12＞L3-L5。盐水注射组亦有极少量分布，但无规律性，可能与个体差异有关。渗出点在躯体大体分布为：下腹部（脐以下）、腹股沟、会阴、下背部(T13以下)、尾巴近端、小腿等处。②皮肤血浆渗出点在身体的左、中、右侧均有分布，以左侧分布最多。渗出点在芥子油注射组和生理盐水注射组的腹部分布在左侧的分别为：3.88±0.40、0.6±0.24个／只，分布在中间的：1.63±0.18、0.40±0.25个／只，分布在右侧的：1.00±0.19、0个／只；背部分布在左侧的渗出点分别为：3.63±0.26、0.8±0.8个／只，分布在中间的：1.63±0.26、0个／只，分布在右侧的：0.87±0.23、0个／只；两组渗出点在各个部位相比均有显着性差异（P＜0.05）。③渗出点分布比较集中的几个部位可以与几个针灸穴区相对应：关元（CV4）-子宫（Ex-CA1）穴区、肾俞（BL23）-命门（DU4）穴区、长强（DU1）-会阴（RN1）穴区、三阴交（SP6）-足三里（ST36）穴区、中脘（RN12）穴区、肝俞（BL18）穴区。各穴区渗出点分布的平均值分别为：3.88±0.30、3.25±0.25、2.25±0.37、1.63±0.26、0.75±0.16、0.75±0.16。结果显示：关元-子宫穴区渗出点分布最密集，与其他穴区相比：除肾俞-命门穴区外均有显着性差异（P＜0.05），肾俞-命门穴区与关元-子宫穴区渗出点分布比较接近。（4）免疫组化染色结果显示：下丘脑内侧视前区、弓状核、室旁核及隔区、杏仁核等部位GnRH免疫反应的表达较明显，且动情周期不同阶段GnRH免疫反应的表达不同。根据着色的深浅及灰度值的不同分为“强、中、弱”的表达。单位面积是指实际切片面积的0.05mm2。①对照组在同一解剖部位：动情周期不同阶段GnRH免疫反应表达的总数量不同。在内侧视前区：动情间期、动情前期、动情期和动情后期的GnRH免疫反应表达分别为：400±2.33、431±3.12、457±2.65、386±4.11阳性反应个数／单位面积；其中GnRH“强”免疫反应表达分别为：53±6.61、88±4.16、94±3.65、57±3.11阳性反应个数／单位面积，动情前期和动情期GnRH“强”免疫反应表达明显多于动情间期和动情后期。②针刺后在动情周期不同阶段GnRH免疫反应的表达在上述核团均有不同程度的增加。尤其在动情间期和动情后期表现明显。动情周期的相同阶段，关元组、内关组和对照组GnRH免疫反应表达的总数量相差不明显，但其中GnRH“强”免疫反应表达的数量三个组之间有显着性差异，关元组表达最多。在内侧视前区：针刺后关元、内关组GnRH免疫反应表达的总数量分别为：动情间期：424±3.17、420±4.32阳性反应个数／单位面积；动情前期：427±2.73、440±4.18阳性反应个数／单位面积；动情期：468±3.46、458±1.78阳性反应个数／单位面积；动情后期：440、425阳性反应个数／单位面积。其中GnRH“强”免疫反应表达的数量分别为：动情间期：92±4.76、75±3.53阳性反应个数／单位面积；动情前期：1.06±5.20、96±5.49阳性反应个数／单位面积；动情期：119±4.86、102±7.74阳性反应个数／单位面积；动情后期：95±6.32、76±3.07阳性反应个数／单位面积。关元组与对照组相比在动情间期、动情前期、动情期、动情后期GnRH“强”免疫反应表达增加的百分率分别为：73.5896、20.4596、30.85％、66.87％。可以看出动情间期和动情后期的GnRH“强”免疫反应表达的增加程度较动情前期和动情期明显。其它部位包括弓状核、室旁核及隔区、杏仁核等部位GnRH免疫反应的表达规律与内侧视前区相似。GnRH免疫反应表达的数量内侧视前区＞弓状核＞室旁核＞隔区、杏仁核。（5）在观察针刺对外周血GnRH、LH水平调节作用的过程中，发现针刺后30min在动情周期各阶段GnRH、LH水平均有增高的表现，60min有不同程度的回降（与30min相比）。①从对照组观察实验的三个时间点：GnRH的水平在0min、30min、60min分别是：动情间期：42.38±2.23、42.60±3.11、46.55±2.58皮克／ml，动情前期：46.37±2.53、44.40±3.47、48.86±2.92皮克／ml，动情期：51.88±3.02、43.47±3.75、51.41±4.77皮克／ml，动情后期：44.26±5.14、44.58±2.93、42.93±1.93皮克／ml。可以看出：在0min GnRH的水平在动情期相对其他周期高；动情前期、动情期在三个时间点GnRH的水平相对动情间期、动情后期在三个时间点GnRH的水平相差大。LH的水平分别是：动情间期：58.66±7.11、54.46±2.32、57.29±5.46 mIU／ml，动情前期：68.65±4.65、62.75±4.60、61.45±4.95 mIU／ml，动情期：61.01±6.02、54.46±4.43、57.61±3.91 mIU／ml，动情后期：55.22±3.22、55.48±2.81、53.61±5.85mIU／ml，可以看出：LH的水平在动情前期相对其他周期高；动情前期、动情期在三个时间点LH的水平相对动情间期、动情后期在三个时间点LH的水平相差小。②针刺对GnRH分泌的促进作用：电针关元（CV4）穴GnRH水平在0min、30min、60min三个时间点分别是：动情间期：41.22±4.90、57.22±4.21、53.30±6.41皮克／ml，动情前期：46.94±7.10、55.50±3.98、47.40±6.90皮克／ml，动情期：49.78±3.92、54.13±4.03、51.32±2.82皮克／ml，动情后期：46.42±2.58、56.58±1.73、50.62±4.45皮克／ml。电针内关穴（PC6）GnRH水平在0min、30min、60min三个时间点分别是：动情间期：41.76±2.73、47.86±4.09、43.83±2.56皮克／ml，动情前期：46.98±3.54、46.70±1.93、45.38±2.67皮克／ml，动情期：50.40±3.75、52.20±1.57、50.16±1.59皮克／ml，动情后期：47.95±2.32、51.77±5.01、47.98±5.54皮克／ml。经统计学分析：在30min动情间期和动情后期关元（CV4）穴组与对照组同阶段相比有显着性差异（P＜0.05），虽然针刺内关穴（PC6）组亦有相应的增高趋势，但与对照组之间无显着性差异（P＞0.05）；从针刺关元（CV4）穴组与内关穴（PC6）组两组效应来看，电针关元（CV4）穴是有比内关穴（PC6）更好的促进GnRH分泌的功能。进一步比较电针关元（CV4）在动情间期、动情前期、动情期、动情后期GnRH水平在0min、30min的变化，结果显示：只有动情后期在0min、30min GnRH水平相比有显着性差异（P＜0.05）。动情间期、动情前期、动情期虽然GnRH水平在30min时较0min高，但与0min时相比无显着性差异（P＞0.05）。③针刺对LH分泌的调节作用：电针关元（CV4）穴LH水平在0min、30min、60min三个时间点分别是：动情间期：57.27±1.89、69.17±3.72、66.75±4.75活性单位／ml，动情前期：72.50±3.35、77.19±2.70、70.18±6.36活性单位／ml，动情期：63.95±5.59、71.53±5.55、68.41±7.31活性单位／ml，动情后期：60.27±4.27、70.36±4.53、64.38±4.98活性单位／ml。电针内关穴（PC6）LH水平在0min、30min、60min三个时间点分别是：动情间期：56.78±3.08、58.70±5.11、61.11±4.07活性单位／ml，动情前期：72.92±3.96、66.96±3.61、66.33±4.60活性单位／ml，动情期：61.97±5.86、60.42±5.83、57.97±4.15活性单位／ml，动情后期：57.41±4.12、60.07±5.32、54.36±5.45活性单位／ml。结果显示：针刺关元（CV4）穴和内关穴（PC6）30min血液中的LH水平较动情周期相同阶段对照组均有升高的趋势。经统计学处理：关元穴（CV4）组与对照组相比在各期均有显着性差异（P＜0.05），而针刺内关穴（PC6）组在30min时虽然亦有相应的增高，但与对照组之间无显着性差异（P＞0.05）。比较电针关元穴（CV4）组与内关穴（PC6）组两组效应，关元穴（CV4）比内关穴（P6）有更好的促进LH水平的功能。进一步比较电针关元（CV4）0min、30min在动情间期、动情前期、动情期、动情后期对LH的调节作用，结果发现动情间期、动情后期在0min、30min时LH水平相比有显着性差异（P=0.043、0.003＜0.05）。动情前期、动情期虽然LH水平在30min时较0min高，但与0min时相比无显着性差异（P=0.387、0.075＞0.05）。（6）下丘脑正中隆起损毁后，针刺关元穴（CV4）前、后GnRH的水平由43.79±1.82皮克／ml变为49.98±2.46皮克／ml，两者相比无显着性差异（P=0.066＞0.05），尽管大于0.05，但治疗后GnRH的水平还是有增高的趋势；LH的水平由46.80±1.02活性单位／ml变为47.52±1.29活性单位／ml；E2的水平由445.70±43.77皮克／ml变为445.74±34.23皮克／ml。LH和E2的水平在治疗前、后几乎没有变化。4结论（1）用电生理方法可以简单快捷的在活体鉴定下丘脑与性唤起相关神经元。结合HRP示踪技术及GnRH免疫组化染色结果：疑似下丘脑与性唤起相关神经元神经元就是GnRH神经元。（2）针刺能有效调节下丘脑GnRH神经元的活性，但不同的穴位调节效应不同。在我们观察的8个穴位中，子宫（Ex-CA1）、关元（CV4）、足三里（S36）的调节作用最佳。部位或穴位的神经节段支配与生殖器官的神经节段支配越接近，对下丘脑GnRH神经元的调节作用越明显。针刺在雌激素水平较低的动情间期和动情后期对下丘脑GnRH神经元电活动增加的百分率能达到或超过雌激素水平较高的动情前期和动情期。（3）“卵巢炎症”在体表的敏感穴区所属的脊髓神经节段与支配卵巢功能的脊髓神经节段相一致。敏感穴区对应的穴位正是特异激活下丘脑GnRH神经元的穴位。（4）电针后下丘脑GnRH免疫反应表达明显增加的部位有：内侧视前区、弓状核、室旁核及隔区、杏仁核等部位。这些核团是调节生殖内分泌功能的关键部位。针刺能调节生殖内分泌功能或许是通过促进这些核团的GnRH免疫反应表达实现的。能使下丘脑GnRH神经元电活动特异性增强的穴位也是能够特异增强GnRH免疫反应表达的穴位，针刺后动情间期及动情后期GnRH免疫反应表达增加的百分率高于动情前期和动情期。（5）GnRH为微量物质，但能控制LH、E2的分泌并表现出同步性。同一穴位在动情周期不同阶段对外周血GnRH和LH水平的调节效应不同，以动情间期和动情后期表现更明显；不同穴位在动情周期相同阶段对外周血GnRH和LH水平的调节效应不同，能使下丘脑分泌GnRH神经元电活动特异性增强的穴位也是促进外周血GnRH和LH水平增高的有效穴位。针刺对生殖内分泌功能的调节主要是促进下丘脑GnRH的分泌，通过HPGA调节LH、E2外周血的水平。
二、视上核大神经内分泌细胞的电生理学进展（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、视上核大神经内分泌细胞的电生理学进展（论文提纲范文）
（1）大鼠下丘脑室旁核神经分泌大细胞谷氨酸能突触传递长时程可塑性机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩写词表 |
| 第一章 大鼠下丘脑室旁核MNCs谷氨酸能突触传递长时程可塑性 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 材料与方法 |
| 1.2.1 实验动物 |
| 1.2.2 实验仪器 |
| 1.2.3 试剂与药品 |
| 1.2.4 离体大鼠下丘脑脑片制备及全细胞膜片钳记录 |
| 1.2.5 刺激电极放置及刺激模式 |
| 1.2.6 生物素染色 |
| 1.2.7 细胞质回收及SC-RT-PCR |
| 1.2.8 统计分析 |
| 1.3 结果 |
| 1.3.1 阻断GABAA和CB1受体,高频刺激诱发下丘脑室旁核MNCs谷氨酸能突触长时程增强(LTP) |
| 1.3.2 阻断mGluR1受体活性对下丘脑室旁核MNCs的谷氨酸能突触LTP诱导的影响 |
| 1.3.3 阻断NMDA受体活性可以消除下丘脑室旁核MNCs谷氨酸能突触LTP |
| 1.3.4 高频刺激诱导下丘脑室旁核MNCs的LTP需要一氧化氮的参与 |
| 1.3.5 高频刺激诱导的下丘脑室旁核MNCs LTP需要通过PKA信号途径 |
| 1.4 讨论 |
| 1.4.1 阻断GABAA和CB1受体活性,高频强直刺激诱发下丘脑室旁核MNCs兴奋性谷氨酸能突触的长时程增强 |
| 1.4.2 PVN MNCs中诱导的LTP依赖于NMDA受体/NO/PKA信号通路 |
| 1.5 结论 |
| 参考文献 |
| 第二章 应激大鼠下丘脑室旁核MNCs谷氨酸能突触传递的长时程可塑性 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 实验动物 |
| 2.2.2 实验仪器 |
| 2.2.3 试剂与药品 |
| 2.2.4 慢性束缚应激刺激 |
| 2.2.5 应激反应的相关指标测定 |
| 2.2.5.1 体重增量 |
| 2.2.5.2 胸腺指数和肾上腺指数 |
| 2.2.6 离体大鼠下丘脑脑片制备以及全细胞膜片钳记录 |
| 2.2.7 刺激电极放置及刺激模式 |
| 2.2.8 生物素染色 |
| 2.2.9 细胞质回收以及SC-RT-PCR |
| 2.2.10 统计分析 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 慢性束缚应激刺激的效果评价 |
| 2.3.2 阻断GABAA和CB1受体活性,高频刺激诱发慢性束缚应激刺激大鼠下丘脑室旁核MNCs谷氨酸能突触长时程压抑(LTD) |
| 2.3.3 高频刺激慢性应激大鼠下丘脑室旁核MNCs的长时程压抑需要CRF受体的参与 |
| 2.3.4 在应激大鼠下丘脑室旁核MNCs中,CRFR1和CRFR2分别介导不同类型的突触可塑性 |
| 2.3.5 高频刺激诱导应激大鼠下丘脑室旁核MNCs谷氨酸能突触LTD通过PKA信号通路 |
| 2.4 讨论 |
| 2.4.1 慢性应激增强下丘脑室旁核CRF mRNA表达神经元的兴奋性 |
| 2.4.2 阻断GABAA和CB1受体活性,高频强直刺激诱发应激大鼠下丘脑室旁核MNCs兴奋性谷氨酸能突触的长时程压抑 |
| 2.4.3 慢性应激大鼠PVN MNCs中诱导的LTD依赖于CRF受体/PKA信号通路 |
| 2.4.4 慢性应激与非应激大鼠下丘脑室旁核MNCs谷氨酸能突触长时程可塑性的诱导机制 |
| 2.5 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 下丘脑室旁核MNCs谷氨酸能突触传递及可塑性的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表论文及获奖 |
（2）脑损伤后慢性意识障碍患者神经内分泌紊乱及其对认知、行为与预后的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 概述 |
| 1.1 慢性意识障碍概述 |
| 1.2 神经内分泌概述 |
| 1.3 脑损伤与神经内分泌 |
| 1.4 意识障碍与神经内分泌 |
| 第二章 脑损伤后慢性意识障碍患者神经内分泌紊乱的观察研究 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 对象和方法 |
| 2.2.1 研究对象 |
| 2.2.2 纳入标准 |
| 2.2.3 排除标准 |
| 2.2.4 研究方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 一般资料结果 |
| 2.3.2 慢性意识障碍患者激素异常发生率及激素异常类型比例 |
| 2.3.3 慢性意识障碍患者与脑损伤后意识正常患者的激素特征分析 |
| 2.3.4 慢性意识障碍患者激素异常的临床单因素分析 |
| 2.3.5 慢性意识障碍患者激素异常的多因素Logistic分析 |
| 2.4 讨论 |
| 2.4.1 慢性意识障碍患者神经内分泌紊乱的发生率 |
| 2.4.2 神经内分泌的调节作用 |
| 2.4.3 脑损伤后神经内分泌紊乱的病理生理机制 |
| 2.4.4 慢性意识障碍患者神经内分泌紊乱的危险因素 |
| 2.5 结论 |
| 第三章 神经内分泌在慢性意识障碍患者认知、行为及预后中的价值研究 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 对象和方法 |
| 3.2.1 研究对象 |
| 3.2.2 纳入标准 |
| 3.2.3 排除标准 |
| 3.2.4 研究方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 一般资料结果 |
| 3.3.2 BCI结果 |
| 3.3.3 GOS评分结果 |
| 3.3.4 CRS-R评分结果 |
| 3.3.5 神经内分泌与BCI在线准确率相关性分析 |
| 3.3.6 神经内分泌与预后相关性分析 |
| 3.3.7 神经内分泌与临床行为学评分相关性分析 |
| 3.4 讨论 |
| 3.4.1 神经内分泌与cDOC认知的关系 |
| 3.4.2 神经内分泌与cDOC行为学的关系 |
| 3.4.3 神经内分泌与cDOC预后的关系 |
| 3.5 结论 |
| 第四章 局限与展望 |
| 4.1 局限性 |
| 4.2 展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读硕士学位期间成果 |
| 致谢 |
（3）基于嗜神经病毒标记技术的大鼠肺俞穴与下呼吸道双向神经通路共同脑核团研究（论文提纲范文）
| 英文缩写词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 实验动物来源 |
| 1.2 试剂与耗材 |
| 1.3 主要仪器与软件 |
| 1.4 溶液配制 |
| 1.5 动物分组与标记策略 |
| 1.5.1 动物分组 |
| 1.5.2 标记与数据分析策略 |
| 1.6 大鼠肺俞穴传入神经通路嗜神经病毒HSV-EGFP顺行标记 |
| 1.7 大鼠肺俞穴传出神经通路嗜神经病毒PRV531-CAG-GFP逆行标记 |
| 1.8 大鼠下呼吸道传入神经通路嗜神经病毒HSV-EGFP顺行标记 |
| 1.9 大鼠下呼吸道传出神经通路嗜神经病毒PRV531-CAG-GFP逆行标记 |
| 1.10 嗜神经病毒标记脑核团定位分析 |
| 1.10.1 脑组织取材与固定 |
| 1.10.2 脑组织冰冻切片 |
| 1.10.3 脑组织玻片扫描与分析 |
| 1.11 内脏组织嗜神经病毒分布检测 |
| 1.11.1 内脏组织取材与固定 |
| 1.11.2 内脏组织冰冻切片 |
| 1.11.3 内脏组织玻片扫描与分析 |
| 2.结果 |
| 2.1 嗜神经病毒标记在不同组织中荧光信号分布情况 |
| 2.1.1 标记处组织荧光信号分布情况 |
| 2.1.2 内脏组织中荧光信号分布情况 |
| 2.1.3 脑组织中荧光信号密度分布特点 |
| 2.2 肺俞穴传入神经通路脑核团嗜神经病毒HSV-EGFP标记结果 |
| 2.3 肺俞穴传出神经通路脑核团嗜神经病毒PRV531-CAG-GFP标记结果 |
| 2.4 下呼吸道传入神经通路脑核团嗜神经病毒HSV-EGFP标记结果 |
| 2.5 下呼吸道传出神经通路脑核团嗜神经病毒PRV531-CAG-GFP标记结果 |
| 2.6 肺俞穴传入神经通路与下呼吸道传出神经通路共同核团 |
| 2.7 下呼吸道传入神经通路与肺俞穴传出神经通路共同核团 |
| 2.8 肺俞穴传出神经通路与下呼吸道传出神经通路共同核团 |
| 2.9 下呼吸道传入神经通路与肺俞穴传入神经通路共同核团 |
| 2.10 肺俞穴与下呼吸道神经通路共同核团 |
| 3.讨论 |
| 3.1 嗜神经病毒示踪法标记外周(肺俞穴和下呼吸道)方法讨论 |
| 3.2 下呼吸道传入神经通路脑核团 |
| 3.3 下呼吸道传出神经通路脑核团 |
| 3.4 肺俞穴传入神经通路脑核团 |
| 3.5 肺俞穴传出神经通路脑核团 |
| 3.6 肺俞穴对肺功能调控的脑核团神经基础 |
| 3.7 肺俞穴反应肺功能的内脏-体表反应脑核团神经基础 |
| 3.8 展望 |
| 4.结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录1.本研究神经核团中英文对照表 |
| 附录2.文献综述 |
| 中脑导水管周围灰质在针刺效应中的作用 |
| 参考文献 |
| 中脑导水管周围灰质的神经投射与功能 |
| 参考文献 |
| 附录3.在校期间发表论文情况 |
| 附录4.在校期间参加学术会议情况 |
（4）精氨酸加压素在中枢神经系统中的作用及机制（论文提纲范文）
| 1 加压素概述 |
| 2 加压素和疼痛 |
| 2.1 加压素与疼痛的关系 |
| 2.2 加压素在疼痛状态下的动态变化 |
| 2.3 加压素参与疼痛调节的机制 |
| 3 加压素与社会行为 |
（5）高温环境下运动大鼠体液调节激素的变化及相关因素的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 1.前言 |
| 1.1 选题依据 |
| 1.2 研究目的和意义 |
| 1.3 研究内容 |
| 1.4 研究假设 |
| 1.5 研究路线图 |
| 2.综述 |
| 2.1 高温环境与运动 |
| 2.1.1 高温环境下运动对机体生理机能的影响 |
| 2.1.2 高温环境对运动能力的影响 |
| 2.2 高温环境与水盐代谢、体液平衡 |
| 2.2.1 体液概述 |
| 2.2.2 水盐代谢 |
| 2.2.3 水盐代谢的调节 |
| 2.2.4 体液的平衡及调节 |
| 2.3 高温环境运动与体液调节激素 |
| 2.3.1 抗利尿激素的生理作用及机制 |
| 2.3.2 醛固酮的生理作用及机制 |
| 2.3.3 心钠素的生理作用及机制 |
| 2.3.4 抗利尿激素、醛固酮、心钠素之间的相互作用 |
| 2.3.5 抗利尿激素的神经内分泌及调节 |
| 3.研究方法 |
| 3.1 研究对象及分组 |
| 3.2 实验方案 |
| 3.3 实验环境的控制 |
| 3.4 取样 |
| 3.5 指标的测定 |
| 3.5.1 血清离子的测定 |
| 3.5.2 大鼠血浆渗透压的测定 |
| 3.5.3 血清抗利尿激素指标的测定 |
| 3.5.4 大鼠血清醛固酮激素指标的测定 |
| 3.5.5 血清心钠素激素指标的测定 |
| 3.5.6 大鼠抗利尿激素基因表达的测定 |
| 3.6 统计学处理 |
| 4.研究结果 |
| 4.1 高温环境下暴露及运动大鼠血清体液调节激素的变化 |
| 4.2 高温环境下暴露及运动大鼠血清钠离子、钾离子、钠离子/钾离子的变化 |
| 4.3 高温环境下暴露及运动大鼠血浆渗透压的变化 |
| 4.4 高温环境下暴露及运动大鼠下丘脑抗利尿激素基因表达的变化 |
| 5.分析与讨论 |
| 5.1 高温和运动对大鼠抗利尿激素及相关因素的影响 |
| 5.2 高温和运动对大鼠醛固酮及相关因素的影响 |
| 5.3 高温和运动对大鼠心钠素及相关因素的影响 |
| 5.4 高温和运动对大鼠下丘脑抗利尿激素基因表达及相关因素的影响 |
| 6.结论 |
| 7.存在的问题及建议 |
| 8.致谢 |
| 9.参考文献 |
（6）大鼠下丘脑前部—延髓内脏中枢参与束缚—浸水应激反应的神经元类型及突触可塑性（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 符号说明 |
| 综述一 大鼠应激性胃粘膜损伤中枢机制的研究进展 |
| 1 应激与应激性胃粘膜损伤 |
| 2 下丘脑前部-延髓内脏中枢与应激性胃粘膜损伤的关系 |
| 2.1 Fos 蛋白与应激 |
| 2.2 延髓内脏中枢与应激性胃粘膜损伤 |
| 2.3 下丘脑前部与应激性胃粘膜损伤 |
| 3 下丘脑前部-延髓内脏中枢神经递质与应激性胃粘膜损伤的关系 |
| 3.1 乙酰胆碱 |
| 3.2 儿茶酚胺 |
| 3.3 5-羟色胺 |
| 3.4 氨基酸 |
| 3.5 一氧化氮 |
| 3.6 催产素 |
| 3.7 精氨酸加压素 |
| 参考文献 |
| 综述二 突触可塑性的研究进展 |
| 1 突触可塑性 |
| 1.1 突出结构可塑性与突触功能可塑性 |
| 1.2 突出前可塑性与突触后可塑性 |
| 2 突触前可塑性相关蛋白研究 |
| 2.1 突触膨体素 |
| 2.2 突触蛋Ⅰ |
| 参考文献 |
| 实验研究 |
| 实验一 束缚-浸水应激大鼠延髓内脏中枢活动神经元类型的研究 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 动物模型制备 |
| 1.3 主要试剂与仪器. |
| 1.4 实验方法 |
| 1.5 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 胃溃疡指数统计 |
| 2.2 延髓内脏中枢 ACh 能神经元在束缚-浸水应激中的反应 |
| 2.3 延髓内脏中枢 CA 能神经元在束缚-浸水应激中的反应 |
| 3 讨论 |
| 3.1 延髓内脏中枢主要核团参与束缚-浸水应激 |
| 3.2 DMV、NA 中ACh 能神经元的过度活动是束缚-浸水应激致胃粘膜损伤的主要机制之一 |
| 3.3 延髓内脏中枢 CA 能神经元参与束缚-浸水应激致胃粘膜损伤的调控，但不是被激活神经元的主要类型 |
| 本章小结 |
| 参考文献 |
| 实验二 束缚-浸水应激大鼠下丘脑前部活动神经元类型的研究 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 实验动物与模型制备 |
| 1.2 主要试剂与仪器. |
| 1.3 实验方法 |
| 1.4 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 下丘脑前部 CA 能神经元在束缚-浸水应激中的反应 |
| 2.2 下丘脑前部 OT 能、AVP 能神经元在束缚-浸水应激中的反应 |
| 3 讨论 |
| 3.1 下丘脑不同部位参与不同应激类型中枢调控 |
| 3.2 下丘脑 PVN 和 SON 中 CA 能神经元与束缚-浸水应激调控 |
| 3.3 下丘脑 PVN 和 SON 中 OT、AVP 能神经元参与束缚-浸水应激调控 |
| 本章小结 |
| 参考文献 |
| 实验三 束缚-浸水应激大鼠延髓内脏中枢 OT、AVP 敏感神经元活动情况的研究 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 实验动物与模型制备 |
| 1.2 主要试剂与仪器. |
| 1.3 实验方法 |
| 1.4 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 DMV 中 OT、AVP 敏感神经元在束缚-浸水应激中的反应 |
| 2.2 NTS 中 OT、AVP 敏感神经元在束缚-浸水应激中的反应 |
| 2.3 延髓内脏中枢其他核团 OT、AVP 敏感神经元在束缚-浸水应激中的反应 |
| 3 讨论 |
| 本章小结 |
| 参考文献 |
| 实验四 束缚-浸水应激不同时间段大鼠下丘脑前部-延髓内脏中枢突触可塑性研究 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 实验动物与模型制备 |
| 1.2 主要试剂与仪器. |
| 1.3 实验方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 胃溃疡指数统计 |
| 2.2 应激不同时间段下丘脑前部-延髓内脏中枢突触膨体素的变化 |
| 2.3 应激不同时间段下丘脑前部-延髓内脏中枢突触蛋白Ⅰ的变化 |
| 3 讨论 |
| 3.1 束缚-浸水应激影响突触膨体素在延髓内脏中枢中的表达 |
| 3.2 束缚-浸水应激影响突触蛋白 I 在下丘脑、延髓内脏中枢中的表达 |
| 本章小结 |
| 参考文献 |
| 全文小结 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间完成的工作 |
（7）不同强度光照对母鸡中脑和间脑c-fos基因表达的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 动物 |
| 2.2 主要材料与仪器 |
| 2.2.1 主要试剂及药品 |
| 2.2.2 主要仪器设备 |
| 2.3 试验方法 |
| 2.3.1 免疫组化试验 |
| 2.3.2 原位杂交试验 |
| 2.3.3 Western bolt |
| 2.3.4 GnRH 的免疫组化检测 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 c-Fos 蛋白免疫组化检测 |
| 3.1.1 Fos 蛋白阳性样免疫反应的特点 |
| 3.1.2 Fos 样免疫反应阳性神经元的分布和形态 |
| 3.1.3 不同强度光照诱导母鸡 Fos 样免疫反应阳性神经元的分布密度 |
| 3.1.4 统计学分析 |
| 3.2 原位杂交检测结果 |
| 3.2.1 原位杂交检测 Fos 蛋白阳性样反应的特点 |
| 3.2.2 原位杂交检测FOS 样阳性神经元的分布和形态 |
| 3.2.3 原位杂交检测FOS 样阳性神经元的分布密度 |
| 3.2.4 统计学分析 |
| 3.3 WESTERN BLOT 检测 |
| 3.4 GNRH 免疫组化检测 |
| 4 讨论 |
| 4.1 不同强度光照对鸡生产性能的影响 |
| 4.2 鸡脑参与光信息传递过程的中枢通路 |
| 4.3 光信息通路神经核团的 GnRH 分泌与含量对母鸡生殖功能起调节作用 |
| 4.4 不同强度光照对母鸡间脑和中脑的神经核的影响 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 在读期间发表的学术论文 |
| 作者简历 |
| 致谢 |
（8）不同运动应激状态下丘脑—垂体—肾上腺轴应激反应机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 序言 |
| 选题依据 |
| 文献综述：运动与神经内分泌免疫网络中枢调节机制研究进展 |
| 一 不同运动应激状态HPA 轴应激激素水平变化 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 分析与讨论 |
| 4 小结 |
| 二 不同运动应激状态HPA轴中枢兴奋性与调节物质变化 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 分析与讨论 |
| 4 小结 |
| 三 不同运动应激状态HPA轴中枢GR、MR、NOS基因及蛋白表达 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 分析与讨论 |
| 4 小结 |
| 四 全文总结 |
| 参考文献 |
| 英文缩略词 |
| 攻读博士学位期间论文发表情况 |
| 致谢 |
（9）光诱导c-fos基因在不同日龄母鸡中脑和间脑的表达（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 引言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 动物 |
| 2.2 主要材料与仪器 |
| 2.2.1 主要试剂及药品 |
| 2.2.2 主要仪器设备 |
| 2.3 试验方法 |
| 2.3.1 溶液的配制 |
| 2.3.2 光诱导c-fos 基因在母鸡中脑的表达的阳性对照 |
| 2.3.3 鸡的光照刺激 |
| 2.3.4 取材 |
| 2.3.5 Fos 蛋白的免疫组化检测 |
| 2.3.6 GnRH 的免疫组化检测 |
| 2.3.7 结果观察和图像分析 |
| 2.3.8 WesternBlot 检测 |
| 3 结果 |
| 3.1 C-FOS 基因免疫组化检测 |
| 3.1.1 Fos 蛋白样免疫反应的特点 |
| 3.1.2 Fos 样免疫反应阳性神经元的分布和形态 |
| 3.1.3 不同日龄母鸡Fos 样免疫反应阳性神经元的分布密度 |
| 3.2 WESTERN BLOT 检测 |
| 3.3 GNRH 免疫组化检测 |
| 4 讨论 |
| 4.1 鸡脑参与光信息传递过程的中枢通路 |
| 4.2 光线对不同日龄母鸡间脑和中脑的神经核的影响 |
| 4.3 光信息通路神经核团的GNRH 分泌与含量对母鸡生殖功能起调节作用 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 在读期间发表的学术论文 |
| 作者简历 |
| 致谢 |
（10）针刺对下丘脑促性腺激素释放激素神经元的调节规律及机制（论文提纲范文）
| ◎中文摘要 |
| ◎英文摘要 |
| ◎英文缩略语表 |
| ◎文献综述 |
| 1 HPGA及其调节 |
| 1.1 下丘脑功能及其调节 |
| 1.1.1 下丘脑GnRH神经元的生理特性 |
| 1.1.2 GnRH神经元在下丘脑的分布及与LHRH神经元的关系 |
| 1.1.3 下丘脑LHRH神经元 |
| 1.1.4 GnRH神经元与其他因子的交互作用 |
| 1.1.5 GnRH神经元的生理作用 |
| 1.1.6 GnRH神经元分泌的调控 |
| 1.1.7 GnRH基因水平的研究 |
| 1.2 腺垂体的功能及其调节 |
| 1.2.1 腺垂体促性腺激素神经元的生理特性及分泌的调节 |
| 1.2.2 促性腺激素的生理作用及作用机制 |
| 1.3 性腺的功能及其调节 |
| 1.3.1 性激素的生理特性 |
| 1.3.2 性激素的生理作用 |
| 1.3.3 性激素在HPGA中的作用 |
| 1.4 神经递质在HPGA中的作用 |
| 1.5 HPGA调节的相关受体及其分布 |
| 1.6 性刺激可促进HPGA的活动 |
| 2 动情周期不同阶段生理特性 |
| 2.1 相关中枢核团神经元活动 |
| 2.2 激素分泌特征 |
| 2.3 组织化学表现特征 |
| 2.4 影响动情周期的因素 |
| 3 中医理论对生殖内分泌系统疾病的认识 |
| 3.1 祖国医学对生殖内分泌轴的认识:肾气-天癸-冲任-胞宫 |
| 3.2 生殖内分泌系统疾病的发病机制 |
| 3.3 针刺对HPGA的调节作用 |
| 3.3.1 针刺可以调节中枢核团神经元电活动 |
| 3.3.2 躯体刺激(包括针刺)可以改变中枢核团组织化学表达 |
| 3.3.3 针刺可以改变血液雌激素水平 |
| 3.3.4 针刺不同穴位的调节效应 |
| 3.3.5 "针刺灌流液"的模拟效应 |
| 3.4 临床针灸广泛用于生殖内分泌系统疾病的治疗 |
| 3.4.1 针刺对月经失调、痛经等的治疗 |
| 3.4.2 针刺对不孕症的治疗 |
| 3.4.3 针刺对更年期综合征的治疗 |
| 4 针刺调节生殖内分泌功能的研究进展 |
| 4.1 穴位特异性功能的研究 |
| 4.2 针刺在动情周期不同阶段效应的研究 |
| 4.3 针刺调节生殖内分泌功能作用途径的研究 |
| 4.4 展望 |
| ◎前言 |
| ◎材料与方法 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 主要试剂的配置 |
| 1.2 主要试剂及抗体 |
| 1.3 主要仪器设备 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 电生理部分 |
| 2.1.1 动情周期不同阶段的鉴定 |
| 2.1.2 下丘脑GnRH神经元的鉴定 |
| 2.1.3 遴选特异激活下丘脑"性唤起"相关神经元的穴位 |
| 2.1.4 数据的统计分析 |
| 2.2 卵巢-体表相关性与穴位关系的研究 |
| 2.2.1 "卵巢炎症"模型的制备 |
| 2.2.2 数据的统计分析 |
| 2.3 免疫组织化学方法检测脑中枢GnRH的表达 |
| 2.3.1 动物的选择及分组 |
| 2.3.2 针刺方法及电刺激条件 |
| 2.3.3 GnRH免疫组化染色(ABC法) |
| 2.3.4 结果观察和图像分析 |
| 2.4 电针在动情周期不同阶段对外周血GnRH、LH、E2的调节 |
| 2.4.1 实验动物及分组 |
| 2.4.2 针刺方法及电刺激条件 |
| 2.4.3 下丘脑正中隆起电解损毁及组织学鉴定 |
| 2.4.4 血液标本的采集 |
| 2.4.5 血样分析 |
| 2.4.6 统计学处理 |
| ◎实验结果 |
| 1 雌鼠动情周期不同阶段阴道涂片HE染色图 |
| 2 下丘脑GnRH神经元的鉴定 |
| 2.1 "性唤起"刺激激活的下丘脑神经元 |
| 2.2 "性唤起"刺激激活的神经元的反馈性调节作用 |
| 2.2.1 静脉注射雌二醇 |
| 2.2.2 静脉注射睾酮 |
| 2.2.3 静脉注射氢化可的松 |
| 2.3 下丘脑与"性唤起"相关神经元与GnRH神经元的关系 |
| 2.4 针刺对下丘脑与"性唤起"相关的兴奋性神经元的影响 |
| 2.5 药物干预后针刺对下丘脑与"性唤起"相关兴奋性神经元的调节作用 |
| 3 卵巢-体表相关性与穴位关系的研究 |
| 3.1 卵巢组织的HE染色 |
| 3.2 伊文氏兰检测出的皮肤血浆渗出点的分布 |
| 3.3 渗出点分布规律及与穴位关系 |
| 4 针刺对下丘脑GNRH免疫反应表达的影响 |
| 4.1 GnRH抗体的阴性对照 |
| 4.2 针刺治疗后在内侧视前区部位GnRH免疫反应的表达 |
| 4.3 针刺治疗后在弓状核部位GnRH免疫反应的表达 |
| 4.4 针刺后室旁核部位GnRH免疫反应的表达 |
| 4.5 针刺后隔区部位GnRH免疫反应的表达 |
| 4.6 针刺后杏仁核部位GnRH免疫反应的表达 |
| 5 针刺对外周血GnRH、LH、E2水平的影响 |
| 5.1 电针对外周血GnRH水平的影响 |
| 5.2 电针对外周血中LH水平的影响 |
| 5.3 下丘脑正中隆起损毁组织的HE染色图 |
| 5.4 正中隆起损毁后针刺对外周血GnRH、LH和E2水平的调节 |
| ◎讨论 |
| 1 下丘脑与"性唤起"刺激相关神经元的活动是通过HPGA调节的 |
| 2 下丘脑与"性唤起"刺激相关神经元疑似GnRH神经元 |
| 3 针刺靶穴对下丘脑GnRH兴奋性神经元有特异增强的激活效应 |
| 4 针刺同一穴位在动情周期不同阶段对下丘脑GnRH兴奋性神经元的激活效应不同 |
| 5 雌激素干预后针刺对下丘脑GnRH神经元的调节作用减弱 |
| 6 "卵巢炎症"的敏感穴区与支配卵巢功能的脊髓神经节段相一致 |
| 7 内脏神经刺激诱发的反射主要通过同侧的交感神经干的脊髓外通路引起 |
| 8 敏感穴区对应的穴位正是特异激活下丘脑GnRH神经元的穴位 |
| 9 针刺治疗内脏疾病的机制 |
| 10 电针后GnRH免疫反应的表达在下丘脑的内侧视前区、弓状核、室旁核明显增强 |
| 11 电针后GnRH免疫反应在隔区、杏仁核区亦有较明显的表达 |
| 12 针刺不同穴位对GnRH免疫增强反应不同 |
| 13 电针同一穴位在动情周期不同阶段GnRH免疫增强反应不同 |
| 14 动情周期的不同阶段外周血GnRH和LH水平是不同的 |
| 15 针刺对外周血GnRH和LH调节作用 |
| 16 针刺对外周血中GnRH和LH水平的调节效应表现出时间性 |
| 17 正中隆起损毁后电针对外周血中GnRH水平的调节几乎不受影响,但LH和E2不同 |
| ◎展望 |
| ◎结束语 |
| ◎参考文献 |
| ◎致谢 |
| ◎个人简历 |
四、视上核大神经内分泌细胞的电生理学进展（论文参考文献）
- [1]大鼠下丘脑室旁核神经分泌大细胞谷氨酸能突触传递长时程可塑性机制研究[D]. 张斌斌. 延边大学, 2020(04)
- [2]脑损伤后慢性意识障碍患者神经内分泌紊乱及其对认知、行为与预后的影响[D]. 吕威. 南方医科大学, 2020(01)
- [3]基于嗜神经病毒标记技术的大鼠肺俞穴与下呼吸道双向神经通路共同脑核团研究[D]. 宋敏. 上海中医药大学, 2019
- [4]精氨酸加压素在中枢神经系统中的作用及机制[J]. 辛培源,王博强,田帅,田硕,梁宸,董正,张婷,金晓航,史娟. 神经解剖学杂志, 2017(02)
- [5]高温环境下运动大鼠体液调节激素的变化及相关因素的研究[D]. 陈宜威. 国家体育总局体育科学研究所, 2012(06)
- [6]大鼠下丘脑前部—延髓内脏中枢参与束缚—浸水应激反应的神经元类型及突触可塑性[D]. 赵东芹. 山东师范大学, 2011(07)
- [7]不同强度光照对母鸡中脑和间脑c-fos基因表达的影响[D]. 兰晓宇. 河北农业大学, 2010(10)
- [8]不同运动应激状态下丘脑—垂体—肾上腺轴应激反应机制研究[D]. 刘志元. 苏州大学, 2010(10)
- [9]光诱导c-fos基因在不同日龄母鸡中脑和间脑的表达[D]. 程金金. 河北农业大学, 2009(10)
- [10]针刺对下丘脑促性腺激素释放激素神经元的调节规律及机制[D]. 王少军. 中国中医科学院, 2007(06)
标签：下丘脑论文; 下丘脑-垂体-肾上腺轴论文; 突触传递论文; 下丘脑激素论文; 基因合成论文;